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  • [PCR室] 抗肌内膜抗体检验方法

    IgA-EMA的检测通常采用间接免疫荧光法(11F法),以猴食管冷冻切片作底物。用人食管组织替代同样可获得满意的结果且实测的IgA-EMA的血清滴度更高,但取材困难。在大规模商业用途时通常选用人脐带组织。多数IgAEMA阳性血清与人脐带静脉冷冻切片反应,可得到阳性...[阅读全文]

  • [PCR室] PCR技术检测副溶血性弧菌

    这几年来,随着微生物基因组学的发展,微生物基因检测迎来了新的机遇。2000年,Makino等已经完成V.p的基因组测序,V.p毒力基因及特异的基因序列得到进一步确定。根据V.p特异基因序列,设计引物,进行PCR检测,是现阶段检测V,p的最快速准确的方法。目前应...[阅读全文]

  • [PCR室] 聚合酶链式反应(PCR) 检测肉毒梭菌技术

    这种方法是运用PCR方法检测肉毒神经毒素基因以鉴定肉毒梭菌,只需2~3天。特别是基层CDC在购买不到试验动物的情况下,PCR所具有快速、简便、特异型强的优点无疑可作为肉毒中毒的辅助检测手段和一项有价值的指标。 P.Fach(1993)报道,应用PCR可检出食品样品...[阅读全文]

  • [PCR室] 人乳头瘤病毒DNA检测作业指导

    项目名称:人乳头瘤病毒DNA(HPV-DNA)检测(多重PCR法) 项目简介: 宫颈癌是一种常见的恶性肿瘤,发病率居女性恶性肿瘤第二位,我国每年新发病例15万左右,8~10万人死于宫颈癌。研究表明,人乳头瘤病毒(HPV)特别是高危型HPV感染是宫颈癌发生的必要条件,...[阅读全文]

  • [PCR室] 病原体检测的PCR技术应用

    1.应用于病毒感染的诊断 目前PCR技术已开始用于甲、乙、丙、戊型肝炎病毒、人类免疫缺陷病毒、巨细胞病毒、乳头瘤病毒、单纯疱疹病毒、风疹病毒、狂犬病毒、EB病毒以及柯萨奇病毒等所引起人类感染病的诊断。如乙型肝炎病毒(HBV)感染,通常采用的反向血凝法...[阅读全文]

  • [PCR室] AFLP技术原理

    AFLP技术是一项新的分子标记技术,是基于PCR技术扩增基因组DNA限制性片段,基因组DNA先用限制性内切酶切割,然后将双链接头连接到DNA片段的末端,接头序列和相邻的限制性位点序列,作为引物结合位点。限制性片段用二种酶切割产生,一种是罕见切割酶,一种是...[阅读全文]

  • [PCR室] 分子生物学基本的常用技术

    DNA重组技术(或基因工程)是20世纪生物学的伟大成就,并已渗透到生命科学包括医学 各个领域,为肿瘤的实验研究和临床诊断及治疗提供了崭新的技术和有用的工具。本附录扼要介绍在分子肿瘤学领域中常用的分子生物学基本技术及其在肿瘤研究中的应用,着重介绍...[阅读全文]

  • [PCR室] PCR检测副溶血性弧菌技术

    近年来,随着微生物基因组学的发展,微生物基因检测迎来了新的机遇。2000年,Makino等已经完成V.p的基因组测序,V.p毒力基因及特异的基因序列得到进一步确定。根据V.p特异基因序列,设计引物,进行PCR检测,是现阶段检测V,p的最快速准确的方法。目前应用...[阅读全文]

  • [PCR室] PCR检测室反应条件的选择

    PCR反应条件为温度、时间和循环次数。 温度与时间的设置: 基于PCR原理三步骤而设置变性-退火-延伸三个温度点。在标准反应中采用三温度点法,双链DNA在90~ 95℃ 变性,再迅速冷却至40 ~ 60℃ ,引物退火并结合到靶序列上,然后快速升温至70~ 75℃ ,在Taq...[阅读全文]

  • [PCR室] 实用DNA突变技术要点

    PCR法扩增启动子5端系列缺失突变体 采用PCR方法从基因组中扩增目的基因的全长启动子,在所扩增的片段两端分别引入限制性内切酶位点,以用于构建pGL3 basic报告基因表达质粒载体。同样采用PCR方法,以目的基因全长启动子报告基因表达质粒为模板分别扩增目的基...[阅读全文]

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