1．新鲜组织或在-80℃保存的组织用恒冷箱冰冻切片机切片，厚度为10～40gm；
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2．将切片裱于载玻片上，立即用电吹风吹干或室温放置30分钟，如不能及时染色，密封后一20℃保存；
3．染色前组织切片用冷丙酮4℃固定10—20分钟，PBS洗2次，每次5分钟；
4。必要时应用0．1％枸橼酸钠与0．1％Triton X—100的混合液将细胞膜打孔。
其余步骤同石蜡切片。
SABC法染色，DAB显色
大鼠小肠腺细胞核呈棕色为BrdU免疫反应阳性
SABC法,ABC显色
胚胎14天大鼠第三脑室周围和室管膜细胞质呈红色为乙酰胆碱转移酶免疫反应阳性
