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细胞免疫染色复染操作步骤

时间:2010-11-25 01:04|来源:实验室前沿| 分享|点击:


     细胞复染常有助于在细胞免疫染色中鉴别不同的细胞类型,或者亚细胞结构。这对组织切片来说是基本步骤,并可鉴定细胞的类型。也可用于其他染色反应。复染不能使用荧光染料,因其复染后可产生自发荧光。为了选择一种适宜的复染方法,首先应检测细胞染色试剂是否在乙醇中可溶。

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    1.不溶于乙醇的方法
    (1)用水轻轻洗涤标本片;
    (2)加数滴Harris苏木精(商品化试剂)于标本中,孵育约5min。染色时间的长短决定染色的强度;
    (3)用水轻轻洗涤;
    (4)用0.5%冰乙酸/99.5%乙醇处理标本片大约10rain;
    (5)用水轻轻洗涤;
    (6)用DPX封片。
 
    2.溶于乙醇的方法
    (1)用水轻轻洗涤标本片;
    (2)加数滴Mayer苏木精(商品化试剂)至标本片,孵育大约5min,染色时间的长短决定染色的强度;
    (3)用水轻轻洗涤;
    (4)用30mm01/L氢氧化铵重复处理标本片
    (5)用水轻轻洗涤;
    (6)用Gelvat01或MOWi。1封片。

复染
推荐用法
需准备试齐
优    点
缺    点
苏木精
可用于黑色或棕色染料;用于核或细胞质抗原染色
可购买
可保存的信息量大;核大
染色很暗,不适合弱抗原信号的显示
甲基绿
可用黑色或棕色染色,用于核抗原染色
贮存液二1%甲基绿溶于100mmol/L    酸钠(pH5.5);工作液为0.1%
染色浅,适用于弱抗原信号,胞质大
获得的组织或细胞精细资料有限
坚固红
用于蓝色染色或LacZ检测,可用于核或细胞质抗原染色
可购买
 
着色很浅,获得的组织或细胞精细资料有限
内容来自实验室前沿网站

 
Tags:步骤,操作,免疫,细胞,染色,用于,用水,洗涤,轻轻,抗原,
责任编辑:何辉

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