检验目的及临床实用性 用于观察菌体上有无鞭毛、鞭毛在菌体上的位置以及鞭毛的数量。在细菌鉴定中,特别是非发酵菌的鉴定中很重要。鞭毛染色可以直接从平板上挑选菌落,或从斜面上刮菌苔涂片即可,但必须注意动作尽量轻,以免鞭毛从菌体上脱落。菌落应是生长在营养较好的琼脂平板(如血平板、营养琼脂)上的过夜培养物。不可采用有抑制剂的选择性培养基,如中国蓝、麦康凯、SS 琼脂等。观察鞭毛时,应耐心寻找整个涂片上的菌细胞,因为并不是涂片上每个细菌细胞上的鞭毛特性及数量都一样,应以鞭毛数量最多的菌细胞为准。
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标本采集与处理
选择正确生理部位和采集合适的标本及其正确运送等环节至关重要。而所有与标本质量有关的检验工作者必须要了解在整个实验过程中保证标本质量的重要性和必要性。 内容来自实验室前沿网站
标本的选择与采集:采集送检标本前,标本选择的种类和采集部位必须反映有效病程。一个没有有效病原体的标本是没有临床诊断价值的。要避免常居菌群随时可能造成的污染,以确保取得反映感染过程的典型标本。
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标本的送检: 所有标本都必须立即送往实验室,最好在2小时内。如不能及时送检,细菌病原体待检标本应按规定条件下存放,通常用于细菌学检验的标本的存放不要超过24小时。临床标本或传染性材料从一个实验室到另一个实验室的送检,不论距离长短,都要求严格注意标本的包装和标签说明。所要运送的材料必须贴上适当的标签,包装得当。送检期间要予以安全防护。
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试剂制备 实验室前沿,了解实验室动态
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试剂(改良Ryu鞭毛染色法)
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F4.3.1A 液 实验室前沿,了解实验室动态
5%石炭酸 10ml
鞣酸 2g sysqy.com
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饱和硫酸铝钾液 10ml
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B 液
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结晶紫酒精饱和液 copyright sysqy.com
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应用液 copyright sysqy.com
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A 液10 份,B 液1 份,混合,室温存放。
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染色方法 copyright sysqy.com
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玻片的处理:要求用新的载玻片。用前须在95%酒精中浸泡24 小时以上。用时从酒精中取出,以干净纱布擦干后使用。 本文来自实验室前沿
方法:在玻片上滴蒸馏水两滴。一张玻片上可同时制2 个涂片。用接种环挑取血平板上菌落少许,将细菌点在玻片上的蒸馏水滴的顶部。一般只需点一下,仅允许极少量细菌进入水滴,不可搅动,以免鞭毛脱落。玻片置室温自然干燥。滴加染液于玻片上,染色。约10~15min 后,用蒸馏水缓慢冲去染液。冲洗时应避免使染液表面的金属光泽液膜滞留在玻片上,影响镜检。玻片自然干燥后,镜检时应从涂片的边缘开始,逐渐移向中心。寻找细菌较少的视野,鞭毛容易观察。细菌密集的地方,鞭毛被菌体挡住,不易观察。
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临床意义 本文来自实验室前沿
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鞭毛染色后于显微镜下可观察到菌体上有无鞭毛、鞭毛的位置及数量,在细菌鉴定中很重要。