使用油镜的方法如下:先将镜筒升高,取下标本玻片,稍稍降低聚光器,并在聚光器的镜头上滴两滴香柏油(油中不应有气泡。如有,可用小木签除去),再将标本盖玻片放回原处,把聚光器升高,使载玻片的底面与香柏油接触。这样,就完成了聚光镜的油浸。接着,在盖玻片上滴上一滴香柏油。然后从侧面窥视,利用粗调使镜筒尽量下降,直至油镜的前透镜浸没在香柏油中(但尚未接触玻片),这样,又完成了物镜的油浸。然后,一边从目镜中观察,一边利用微动手轮将镜筒缓缓上升(注意不要拧错了方向,压碎盖玻片),直至视野中出现最清晰的物像为止。
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聚光镜的油浸,还可以采用另一种滴油方法:即不直接把油滴在聚光器的镜头上,而是把载玻片翻过来,将油滴在载玻片的底面上,然后在翻过去,对准放置于聚光器上面,再使聚光器上升。来完成聚光器的油浸。这种方法虽然不那么顺手,但比较安全。有些人使用玻璃棒直接与聚光镜接触来涂抹香柏油,这种方法容易划伤镜片,不宜采用。
在使用油镜时,允许在聚光镜与标本之间不加香柏油,即聚光镜上仍以空气为介质,但这会牺牲物镜的分辨率。 sysqy.com
如果油镜观察后,有需要转回高倍物镜观察,应将盖玻片上的油擦去,以免沾污高倍物镜。但聚光器上的油可以不擦,只要把光栏适当缩小一点即可。
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油镜使用完毕后,要及时将香柏油擦拭干净。镜头上可先用干净的擦镜纸擦干净即行。聚光镜的擦拭方法与此相同。如标本需要保存,玻片上的香柏油可用"拉纸法"擦拭干净。即将擦镜纸覆盖在玻片上,在纸上滴上一滴二甲苯,趁湿将纸条平拖着往外拉,连续几次即可擦干净。 内容来自实验室前沿网站
最后指出:在整个调焦过程中(尤其是高倍物镜和油镜的调焦),每个动作都要缓慢进行。否则,物像会一闪而过,找不到观察目标。
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一、显微镜的维护
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(一) 经常性的维护
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1. 防潮 如果室内潮湿,光学镜片容易生霉,生雾。一旦生霉,很难除去。内部的镜 片由于不便擦拭,潮湿对其危害性更大。机械零件受潮,容易生锈。为了防潮,除了选择干燥的房间外,存放地点也应离墙、离地、远离潮湿。显微镜箱内应放置1~2袋硅胶作干燥剂。
2.防尘 光学元件表面落入灰尘,不仅影响光线通过,而且经光学系统放大后,会生成很大的污斑,影响观察。灰尘、砂粒落入机械部分,还会增加磨损,引起运动受阻,危害同样很大。因此,必须经常保持显微镜的清洁。
3防腐蚀 显微镜不能和具有腐蚀性的化学试剂放在一起,如硫酸、盐酸、强碱等。 内容来自实验室前沿网站
4.防热 防热的目的主要是为了避免热胀冷缩引起的开胶与脱落。
(二) 使用中的维护
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使用时一定要正确操作,小心谨慎。在不少情况下,仪器的损坏是由于操作粗心或操作方法错误引起的。例如:
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1. 微调是显微镜机械装置中较精细而又容易损坏的元件,拧到了限位以后,就拧不动了。此时决不能强拧。否则,必然损坏。调焦时,遇到这样情况,应将微调退回3~5圈,重用粗调调焦,待初见物像后,在改用微调。如能事先将微调调至中间位置(一般在微动燕尾的侧面上刻有位置标记"- ="当微动燕尾上的单线对着两横线的中间时,微调即处于中间位置),使正反两个方向都有大体相等的调节余量,当然更好。 本文来自实验室前沿
2.使用高倍镜观察液体标本时,一定要加盖玻片。否则,不仅清晰度下降,而且试液容易浸入高倍镜的镜头内,使镜片遭受污染和腐蚀。
3油镜使用后,一定要擦拭干净。香柏油在空气中暴露时间过长,就会变稠和干涸,到这时再去擦拭就比较困难了。镜片上留有油渍,清晰度必然下降。
4仪器出了故障,不要勉强使用。否则,可能引起更大的故障和不良后果。例如,在粗动手轮不灵活时,如果强行旋动,会使齿轮、赤条变形或损坏。 实验室前沿,了解实验室动态
(三) 光学系统的擦拭
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平时对显微镜的各光学部分的表面,用干净的毛笔清扫或用擦镜纸擦拭干净即行。在镜片上有摸不掉的污物、油渍或手印;镜片生霉、生雾;长期挺用后复用时,需要进行比较认真的擦拭。 本文来自实验室前沿
1.擦拭范围 目镜和聚光镜允许拆开。物镜因结构复杂,装配时又要专门的仪器来校正才能恢复原有的精度,故严禁拆开。 拆卸目镜和聚光镜时,要注意以下几点:
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(1) 小心谨慎
(2) 拆卸时要标记各元件的相对位置(可在外壳上划线作标记)、相对顺序和镜片的正反面,以防重装时弄错。 内容来自实验室前沿网站
(3) 操作环境保持清洁、干燥。拆卸目镜时,只要从两端旋出上下两块透镜即可。目镜内的视场光栏不能移动,否则会使视场界线模糊,聚光镜旋开后严禁进 镜,因其上透镜是油浸的,出厂时经过良好的密封,在分解会破坏它的密封性 2.擦拭方法 先用干净的毛笔或吹风球除去镜片表面的灰尘。然后用干净的绒布在 镜片中心开始向边缘作螺旋形单向运动。擦完一次把绒布换个地方,直至擦干净为止。如果镜片上有油渍、污物或指印等擦不掉时,可用柳枝条裹上脱脂棉,蘸少量酒精和**** 合液(酒精80%,****20%)擦拭。如果有较重的霉点或霉斑无法除去是4。可用棉签 湿后粘上碳酸钙粉(含量为99%以上)进行擦拭。擦拭后,应将粉末清除干净。镜片是否干净可用可用镜片上的反射光线进行检查。要注意的是,擦拭前一定要将灰尘除净,否则灰尘中的砂粒会将镜面划起沟纹。不准用毛巾、手帕、衣服等去擦拭。酒精****混合不可用的太多,以免脱胶。镜片表面有一层紫蓝色的透光膜,不要误作污物来擦拭。
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(四) 机械部分的擦拭 实验室前沿,了解实验室动态
表面涂漆部分,可用布擦拭。但不能使用酒精、****等有机溶剂,以免脱漆
机械装置故障的排除 copyright sysqy.com
(一)粗调部分的故障排除
粗调的主要故障是自动下滑或升降时松紧不一。所谓自动下滑是指镜筒或镜臂静在某一位置时,不经调节,在它本身重量作用下,自动地慢慢滑下来的现象。其原因是镜筒或镜臂本身的重力大于静摩擦力引起的。解决的办法是增大静摩擦力,使之≥镜筒或镜臂本身的重力。
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直筒显微镜的静摩擦力来源于手轮和齿杆套之间的赛璐珞垫圈。如果手轮和齿轮杆套从两侧把它压得愈紧,静摩擦力就愈大。调整时,用一只手握住粗动手轮双眼螺母上打有固定销的一端,另一只手用双眼螺母插入无固定销的一端,用力旋紧,即可制止下滑。 实验室前沿,了解实验室动态
如不奏效,说明垫圈太薄,应将不打固定销的双眼螺母旋出,拔出手轮,更换或加厚垫圈,然后上紧,即可排除故障。
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另一种直筒显微镜的粗调机构,其齿杆套是夹头式的,两只螺丝紧压着夹头,使齿轮获得足够的静摩擦力。当下滑是4,只要适当旋紧这两个螺丝,即可排除故障。
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第三种直筒显微镜的粗调机构是压板式的。当下滑时,只要旋紧螺丝,即可制止下滑。
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斜筒显微镜的粗调机构。当镜臂自动下滑时,可用两手分别握住手轮,用力拧紧,即可制止下滑,如不奏效,则应更换较厚的垫圈或锥形轴套。 内容来自实验室前沿网站
镜筒自动下滑,往往给人与错觉,误认为是齿轮与齿条配合的太松引起的。于是就在齿轮下加垫片。这样,镜筒的下滑虽然被暂时止住,但却使齿轮和齿条处于不正常的咬合状态。运动的结果,使得齿轮和齿条都变形。尤其是垫得不平时,齿条的变形更厉害。结果是一部分咬得紧,一部分咬得松。因此,这种方法不宜采用。
此外,由于粗调机构长久失修,润滑油干枯,升降时会产生不舒服的感觉,甚至可以听到机件的摩擦声。这时,应将机械装置拆下清洗,上油脂后重新装配。
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(二) 微调部分故障的排除
微调最常见的故障是卡死与失效。
杠杆式微调的主要故障是卡死。其原因一是由于限位螺钉经常受到摩擦和撞击,产生了摩损和变形;其次是操作时,到了限位后没有感觉出来,继续用力旋转,使两个零件的限位部分发生对卡。这时,应更换与限位销钉连接的零件、限位器或限位螺钉、甚至全套微调装置后才行。如果损坏不严重,也可把限位销钉的端面锉去适量,让螺杆多走一圈才限位。 实验室前沿,了解实验室动态
若微调上升时有效,下降时失效,则可能是微动燕尾上的压缩弹簧弹力不足或燕尾槽由于缺油,或撞击变形等原因配合得过紧所至。前者应更换弹簧,后者应加油或修理燕尾槽。 sysqy.com
此外,装配不正确也会使微调失效。例如,缺乏经验者,拆开微调重新装配说,没有把顶杆顶至燕尾上。碰到这种情况,只要重新装配合适即行。 copyright sysqy.com
齿轮式微调的主要故障是失效。原因是限位螺钉长期磨损或到了限位以后继续用力旋转,使限位跳过,造成扇形齿轮过位脱落所至。这时应更换限位螺钉,并使扇形齿轮正确复位。 sysqy.com
微调机构零件细小,结构紧凑,是显微镜中最精细的部分,并且又安装在仪器内部,修理时一定要小心。没有一定把握,不要随便乱拆。
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(三) 物镜转换器的故障排除
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物镜转换器的主要故障是定位装置失灵。一般是定位弹簧片损坏(变形、断裂、失去 弹性、弹簧片的固定螺钉松动等)所致。更换新弹簧片时,暂不要把固定螺钉旋紧,应按第三节中所讲的方法,先作光轴校正。等合轴以后,在旋转螺丝。若是内定位式的转换器,则应旋下转动盘中央的大头螺钉,取下转动盘,才能更换定位弹簧片,光轴校正的方法与前面相同。
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(四) 聚光器升降机构故障排除 内容来自实验室前沿网站
这部分的主要故障也是自动下滑,排除方法如下: 实验室前沿,了解实验室动态
1. 直筒显微镜聚光器的升降机构 调整时,一只手用双眼螺母扳手插入手轮端面上的双眼螺母内,另一只手用螺丝刀插入另一端的大头螺钉槽口内,用力旋紧即可制止下滑。
2.斜筒显微镜的升降机构调整时,首先用螺丝刀把双眼螺母中间的驻镙退出1~2圈,轴承垫圈是与驻镙压紧配合的,因此,也会跟着它一起退出,并脱离齿杆的端面。然后,用双眼螺母扳手把双眼螺母向调节座旋进。同时,用另一只手转动手轮,进行实验,直到升降机构松紧合适,又能停留在任意位置上时,才停止双眼螺母的旋进。最后,再把驻镙旋入,是轴承垫圈接触齿杆就行了。 本文来自实验室前沿
这样调整之所以能够排除故障,是因为调节座的内孔是锥形的。锥形轴套在轴向有槽口。当双眼螺母向里旋进时,将锥形套向里顶,使锥形套在前进时,槽口变小,内孔收缩,将齿杆夹得更紧,加大了齿轮转动的摩擦阻力,从而制止自动下降。
其他显微镜简介 实验室前沿,了解实验室动态
一、 暗视场显微镜
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暗视场显微镜又叫暗视野显微镜。它与普通的显微镜的主要区别是照明方式不同。它用强而窄的斜射光束照射标本,而又不让光束进入物镜。在没有光进入物镜时,视场是黑暗的,故叫暗视场显微镜。但由于标本中的微粒受光照射后能够散射光线,当散射光线进入物镜时,在显微镜中能够看到微粒的散射光点,好象微粒本身在发光一样。这道理正如在一间较暗的室内,从墙上的小孔中射入一束强烈的阳光,我们在光路上能够看见灰尘的存在一样。这种现象,在光学上被称为丁道尔现象。暗视场显微镜就是根据这一原理设计的。
暗视场显微镜能够观察到0.004μm以上的微粒存在。普通显微镜看不见的微粒,它可以看见。但它只能看到物体的外表轮廓和运动状态,而不能辨认其内部结构。 本文来自实验室前沿
从结构上看,只需将普通显微镜更换上一个暗视场聚光器即可变为暗视场显微镜。常用的暗视场显微镜有抛物面形和心形两种。
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它们的共同特点是在聚光镜下面的中央部分设有挡光板。照明光束只能从聚光镜边缘的环行圈内进入,经透射镜的反射面反射后,斜着射向标本,并在盖玻片上进行全反射。其结果是既照亮了标本。光束又不直接进入物镜,从而达到了暗视场照明的目的。 内容来自实验室前沿网站
二、荧光显微镜
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(一) 荧光显微镜的工作原理 实验室前沿,了解实验室动态
一些物质在受到人眼所看不到的高能紫外线激发照射时,会产生比原激发波长较长的可见光。人们把这种光叫做荧光。这种现象叫做荧光现象。有两种荧光现象:一种是受激发光照射时,物质本身能发荧光,叫做自体荧光。另一种是物质要先经过荧光色素染色,才会产生荧光现象。这后一种被称为继发荧光,在医学检验中大部分的测量都是继发荧光。不同的荧光物质所需要的激发光的波长不尽相同。而且受激后所产生的荧光光波也不相同。 内容来自实验室前沿网站
通过观察物质所发出的荧光来对物质进行研究的显微镜叫做荧光显微镜。
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采用荧光显微镜,可以观察到普通显微镜看不见的无色透明的组织或细胞。一般是先将这些标本用荧光色素染色,再将标本放在荧光显微镜下,用紫外光线照射激发,使标本发出荧光(可见光)然后通过显微镜,观察标本的荧光图象。由此可见,荧光显微镜的光源不是作为照明用的,而是作为激发光,去激发荧光色素产生荧光。
(二) 荧光显微镜的结构
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和普通显微镜比较,首先荧光显微镜要有一个能产生高能紫外线的光源。一般采用汞灯或 氙灯作紫外光源,也有用 钨灯的。紫外光源因其功率较大(100W以上)尤其是汞灯和氙灯所需要的电压高达上千伏,一般都专门设一个电源箱来供电。 sysqy.com
其次是从光源灯到标本之间,紫外线所经过的所有光学元件,均需使用对紫外线通透性能好的材料如石英制成。普通的光学玻璃不能透过320nm以下的紫外线。如果 所用的激发光线较长,如350nm以上,则普通光学玻璃也能使用。 实验室前沿,了解实验室动态
最后,在光源与标本之间需要设置激发率光片,用以选出照射标本所用的激发光,在标本和目镜之间设有荧光(或曰发射)滤光片,该滤光片只让荧光通过,而隔断紫外线(紫外线对眼睛有伤害)。激发和荧光滤光片可以各有多块,以便满足不同的需要。
(三) 透射式荧光显微镜
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根据光线对标本照射方式不同,荧光显微镜可分为透射式和落射式两种。光路中除了增加了激发光荧光两块滤光片外,其余部分和普通电光源显微镜基本相同。只是该机为了避免直射入市场,使用了暗视场聚光器。当然,也可以不使用暗视场聚光器。这种方式适合于观察无色透明的标本,应用较广。但现在已不使用了。 sysqy.com
(四) 落射式荧光显微镜 内容来自实验室前沿网站
从光源发出激发光,经聚光镜会聚,再经聚光镜和激发滤光片后射向分镜。分镜具有这样的特性,它能反射波长较短的紫外线而让波长较长的荧光通过。激发光经它反射后射向物镜,再经物镜聚光,垂直射向标本。标本受到激发后产生出荧光。荧光经过物镜和分镜后,到达荧光滤光片。荧光滤光片将标本产生的荧光之外的光滤除掉,而只让荧光通过目镜送入人眼中。这种装置,光源处在标本的上方,故称为落射式。它适用于观察透明度不好的标本以及各种活体组织。 sysqy.com
三、倒置显微镜 sysqy.com
倒置显微镜的光路 光源灯产生的光经聚光镜照射在标本上。标本经物镜放大、以及转换系统转换后成像在目镜的物方焦平面上,经目镜再一次放大后,由人眼观察。
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照明系统位于标本之上,而物镜则在标本之下,这和一般的生物显微镜正好相反,"倒置"的名字由此而得。
倒置显微镜只是显微镜的形态与正置有区别而已,但都可以配置相差、荧光、DIC、HMC、偏光等装置。
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