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  • [PCR室] 实时荧光RT-PCR方法检测新型冠状病毒核酸作业指导书

    实时荧光 RT-PCR 方法检测新型冠状病毒核酸 (一)目的。 规范实时荧光RT-PCR方法检测新型冠状病毒核酸的工作程序,保证实验结果的正确可靠。 (二)范围。 适用于实时荧光RT-PCR方法检测新型冠状病毒核酸。 (三)职责。 检测人员:负责按照本检测细则对被...[阅读全文]

  • [PCR室] 新型冠状病毒肺炎实验室检测技术指南(第四版)(操作流程)

    2月6日,国家卫生健康委发布了新型冠状病毒感染的肺炎防控方案(第四版),同时作为附件发布了新型冠状病毒感染的肺炎实验室检测技术指南(第四版)。 一、标本采集 (一)采集对象。 新型冠状病毒肺炎疑似病例、临床诊断病例(仅限湖北省)和聚集性病例,其...[阅读全文]

  • [PCR室] 核酸检测操作流程

    1. 核酸提取 使用硅胶柱离心、磁性硅胶颗粒分离方法以及自动化仪器等商品化试剂或设备并按说明书操作。提取RNA时应注意防止RNA降解。DNA应置于-20℃保存,RNA和需长期保存的DNA应置于-80℃保存。 2. 逆转录合成cDNA 逆转录cDNA合成反应需使用逆转录引物、dNT...[阅读全文]

  • [PCR室] 新型冠状病毒咽拭子采集标本流程

    新型冠状病毒标本采集咽拭子标本采集流程视频...[阅读全文]

  • [PCR室] 用有机溶剂沉淀法分离与纯化蛋白质

    有机溶剂能降低溶液的电解常数,从而增加蛋白质分子上不同电荷的引力,导致溶解度的降低;另外,有机溶剂与水的作用,能破坏蛋白质的水化膜,故蛋白质在一定浓度的有机溶剂中的溶解度差异而分离的方法,称有机溶剂分段沉淀法,它常用于蛋白质或酶的提纯。使...[阅读全文]

  • [PCR室] 用盐析方法分离与纯化蛋白质

    ①原理:盐析法对于许多非电解质的分离纯化都是适合的,也是蛋白质和酶提纯工作应用最早,至今仍广泛使用的方法。其原理是蛋白质、酶在低盐浓度下的溶解质随着盐液浓度升高而增加(此时称为盐溶);当盐浓度不断上升时,蛋白质和酶的溶解度又以不同程度下降...[阅读全文]

  • [PCR室] PCR设置内参照的定量方法

    PCR可分析极微量的DNA,并可同时扩增多种序列,已应用于基因转录水平的研究。尽管PCR是一种较理想的核酸定量方法,但实验方案的选择对PCR定量的成功与否极为重要,因为PCR是一个指数过程,控制反应率的任一参数的微小变化都会显著影响产物的生成量,在这些...[阅读全文]

  • [PCR室] PCR检测常见问题汇总(精品)

    PCR产物的电泳检测时间 一般为48h以内,有些最好于当日电泳检测,大于48h后带型不规则甚致消失。 假阴性,不出现扩增条带 PCR反应的关键环节有①模板核酸的制备,②引物的质量与特异性,③酶的质量及, ④PCR循环条件。寻找原因亦应针对上述环节进行分析研究...[阅读全文]

  • [PCR室] 基因调节元件的特点及用途

    基因调节元件的测绘和分析(gene regulatory elements mappmg and analysis,GREMA)技术是由加州大学圣地亚哥分校(UCSD)付向东博士领导的研究小组发明的,并已经独家授权给ASB做商业开发。这一技术通过以下方法克服了第一代ChIPChip分析的限制。首先它不用免...[阅读全文]

  • [PCR室] 限制性酶及PCR的技术

    限制性酶及PCR的方法 此法将MSRE和PCR技术的结合,大大提高了检测DNA甲基化的灵敏度。该法基于DNA经MSRE切割后,位于限制性位点侧翼的特异性引物仅能有效扩增那些甲基化而免于切割的DNA片段,但不能扩增未甲基化且遭受切割的DNA片段。本法定性只需0.6ngDNA...[阅读全文]

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