医院病理科档案中积存的大量石蜡包埋组织，是分子生物学研究材料的重要来源之一。1988年，Rupp，Locker成功地从蜡块中提取出RNA，结束了RNA研究依赖于新鲜或冰冻探针的历史，扩展了它在分子生物中的应用范围，这对诊断与鉴别诊断研究及评估患者预后具有重要价值llI。但是， 目前提取RNA方法尚不统一，仍存在时间长、用量大、易降解等缺陷。为此，我们设计4种从石蜡组织中提取RNA的方法，通过比较以期从石蜡组织得出一种快速、经济、有效提取RNA的方法。 copyright sysqy.com sysqy.com
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讨论
随着人类基因组测序基本完成，出现了利用档案组织检测基因表达的新技术。如果用PCR的方法扩增存储标本中的RNA，则将在分子流行病学和基因的回顾性研究中具有巨大的潜力，因为能增加有效的研究周期和标本数量 Mizuno等 在1952至1989年期间从福马林固定和石蜡包埋的尸检组织中提取RNA，结果证实利用存放数十年的常规档案的组织蜡块进行设计大宗病例回顾性研究是可行的 我们从储存1年的石蜡标本中提取RNA．获得的结果与文献一致。目前，石蜡组织提取RNA虽然可行，但方法有多种，尚不统一。影响RNA提取质量的因素很多．如二甲苯孵育温度、时间，酒精去除二甲苯的时间、蛋白酶K孵育时间等。石蜡组织在二甲苯、
洒精中的时间过长可致RNA降解，提取时间过长也可导致RNA降解。我们从提高材料的有效利用率、防止RNA降解、缩短提取时间等方面综台考虑．设计了4种方法。应用电泳、分光光度计、RTPCR等技术验证提取的样品，结果表明．几种方法都可以提取到RNA，且能达到检测目的 方法l提取RNA用料最少，在二甲苯中去蜡时间较短、RNA降解少，纯度较高；方法2、3在二甲苯中．蛋白酶K孵育时间较长，所提RNA降解较多；方法4取材多、实验周期长、RNA降解过多。通过比较，方法l具有取材少、实验周期短．提取RNA的质量高、运角方便等优点 这～方法的建立有助于阐明某些临床过程较长、不易进行前瞻性研究的疾病发生的分子机理，具有广阔的应用前景。文/马晓丽 sysqy.com
