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碘化丙啶原理及染色方法

时间:2010-06-24 02:30|来源:实验室前沿| 分享|点击:


 1.原理  碘化丙啶(propidium iodide,PI)不能穿人完整的活细胞膜中,即正常细胞和凋亡细胞在不固定的情况下对PI拒染,而坏死细胞由于失去膜的完整性,PI可进入细胞内与DNA结合,根据此特点,使用PI染色可鉴别死细胞。如果对活细胞染色必须在染色前进行固定,以增加细胞膜对染料的通透性。 实验室前沿,了解实验室动态

 
    2.溶液配制  使用0.01mol/LPBS(pH 7.4)配制终浓度为0.5mg/ml的PI工作液。
 
    3.染色程序
    (1)单层细胞培养标本经预冷70%乙醇固定1小时,4℃;
    (2)0.01mol/LPBS(pH 7.4)冲洗;
    (3)沥干后加入PI工作液,室温孵育15分钟;
    (4)冲洗后封片。
 
    结果:PI最大激发波长和最大发射波长分别为488nm和630nm,荧光显微镜观察,DNA呈红色荧光。
Tags:方法,原理,细胞,PI,
责任编辑:何辉

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