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制作病理活检标本的注意事项

时间:2010-07-27 03:34|来源:实验室前沿| 分享|点击:


      目前,小组织活检标本的有胃肠粘膜、肾脏 穿刺、肝脏穿刺,肺支气 管 镜、复垦刮宫和 鼻咽粘膜活检等。这些组织为了赶进度,只能跟大组织一起进入自动脱水机脱水程序。由于 组织 较小,他们经受了不该经受的待遇,过 度的脱水,过度的透明和过度的浸 蜡,往往这些组织制作 起来需要费点力气,切片时容易脆,連 续切片时切片不好展开,容易出现皱折等,另者鼻咽粘膜活检还可出现染色不好的现象,如何解决上述的问题呢 。我们的作法是:

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1、固定液的量要冲分。据了解如鼻咽部粘膜活检,所用装标本的容器多用青霉素小瓶,瓶中固定液的量极少,当将组织放入固定时,固定液没能充分的 将组织浸没,此其一,其二是由于固定液量少,含有大量粘液样的组织将固定液稀释,降低了固定液的浓度,达不到固定的效果。组织固定不好,核的染色肯定不好,要改变这种现象,就必须改变固定液的量。

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2、对于多块小组织,应将其埋藏在一水平面上。多块的组织如胃肠粘膜活检和刮宫活检,多块 组织取于不同的部位,反映着各个部位的病变,如果没有埋 藏于同一水平面上,组织块深浅不一,切片时就很难切到每一块组织,有时还会漏切,造成事故。                          内容来自实验室前沿网站

 3、要保证石蜡的硬度和纯度。石蜡是一种碳氢化合物,由矿物油分裂产生,它的性质是相当的不同,熔点在45-62 C之间,熔点越高,硬度越 硬,如果含有杂质和纯度不高,就很难切出佳片。小组织由于几个过度,组织较硬,应用的石蜡也要较硬,否则组织硬石蜡软是切不出好片来的,切出来的切片也较难展平,容易产生皱折。另者,包埋组织块的石蜡纯度一定要纯,不能含有二甲苯,如果含有二甲苯,将会降低石蜡的硬度,裱片时,石蜡将熔解于水并向四边扩散。常规应用的石蜡熔点为60C 左右,它能支撑起3-5um的切片,如果要求厚度在1-2  cm, 就必须添加一 些蜂蜡,以增加石蜡的硬度。

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4、蜡块要在切片前存放在冰格内冰冻起来,保证组织和蜡在同一温度,这样有利于切片。如果蜡和组织不在同一温度,由于组织的几个过渡,组织硬,蜡软,就很难切出好的切片来,切片时通常不要取出太多冰冻好的蜡块,否则室温可使蜡软下来,尤其是在夏天,另外切片时,切片刀和蜡块的磨檫产热,也会导致蜡块软化,切片时切片积压在一起,不容易展开,不利于切片。

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5、在一张载玻片上要多捞几张切片。小块组织,可看面积不多,切片时尽量多裱些切片,以增加多些看点,增加不同层次组织变化的场面,以利于对疾病作出判断。 内容来自实验室前沿网站

6、组织固定要充分。有人认为组织这么小,随便都能将其固定好,其实不然,有人认为,如鼻咽部的粘膜组织,固定的时间在4-6小时,因为鼻咽部粘膜组织虽然小,但 却含有大量的淋巴细胞,固定液和组织细胞的反应是需要时间的,固定液与组织中的各物质反应是很复杂的:与蛋白质和肽类的反应,甲醛与组织蛋白类的反应是多样而复杂的,因为它能和多种不同的功能基团结合,在多数情况 下在其间形成桥键。甲醛在相邻的蛋白质键间形成桥键的作用,是由于它是一个聚合固定剂。据 French 和 Edsall (1965),最常遇到的甲醛反应,就是加到一个含反应性氢原子的化合物中,形成一个羟甲基化合物*;甲醛有效固定作用的另一要点是在蛋白质末端基团间形成交联链*。这些组织中的物质与固定液间的反应是需要时间的,因此,要让组织充分固定好才能织和切片。  作者:南方医科大学病理教研室,南方医院病理科  蔡俊杰

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责任编辑:何辉

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