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提高IHC方法敏感性的方法

时间:2011-01-02 01:29|来源:实验室前沿| 分享|点击:


(1)蛋白酶消化蛋白酶消化可以去除覆盖于抗原决定簇表面的杂蛋白,更为重要的是因甲醛固定而引起的交联被打开,有利于抗原—抗体的结合,提高阳性检测率。 内容来自实验室前沿网站

  (2)抗原修复选择适宜的修复液(pH值、离子浓度)、修复方式、温度。
 
    (3)抗原修复与酶消化结合使用。
 
    (4)高敏感显色方法的选择DAB是IHC染色中HRP最常用的供氢体,如在其显色液中加入一定量的金属离子,例如Ni、Cu、Ag等,不但可提高其敏感性,还可以改变其终产物的颜色。TMB即四甲基联苯胺盐酸盐,是一种敏感性较高的显色基团。NBT/BCIP为碱性磷酸常用的显色剂,其敏感性要远高于HRP的DNA显色剂。另外,开展膜上杂交或蛋白检测可用高敏感的化学发光检测技术。
Tags:方法,提高,修复,蛋白,抗原,消化,敏感性,检测,选择,离子
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