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  • [病理室] 免疫金银染色(IGSS)操作流程

    石蜡切片IGSS (1)切片脱蜡至水。 (2)0.1%胰蛋白酶37℃消化20min或抗原修复20min(98℃),自然冷却至室温。 (3)0.05mol/L(pH7.4)TBS洗33min。 (4)l%EA(卵蛋白)15min,不洗。 (5)适当稀释的特异抗体室温4h或4℃孵育20h,或37℃孵育1h。 (6)0.05m01/L(pH7...[阅读全文]

  • [病理室] 细胞病理(TCT)巴氏染色流程

    染色方法 1、经固定的涂片入水、苏木精染核、盐酸酒精分化、返兰同HE染色 。 2、70%、80%、95%酒精逐级脱水各1min。 3、桔黄G6 3~5 min 。 4、95%酒精二缸漂洗各1 min 。 5、EA36或EA50 5 min 。 6、95%酒精二缸漂洗各1 min 。 7、无水酒精二缸漂洗各1 min...[阅读全文]

  • [病理室] 盖玻片上生长的细胞进行染色

    检测的目的:检测范围大约为每个细胞表达1 00010 000个抗原分子。 一、特点 快速简便;检测抗原的存在及定位;定性,半定量;灵敏度依赖于抗原量及位置;高浓度抗原,用低亲和力抗体也能检测。 二、操作步骤 (1)在细胞染色前将盖玻片灭菌处理,将圆形盖玻片(...[阅读全文]

  • [病理室] 弹性纤维特殊染色操作规程

    弹性纤维主要由弹性蛋白(一种黄*色硬蛋白,它是黄*色弹性纤维组织的主要成分,干燥时易脆,而湿润时呈弯曲并富弹性)构成。它广泛分布于全身的各个部位,尤以循环系统,呼吸系统和皮肤系统为甚。新鲜时它呈黄*色,固又称为黄*色纤维。弹性纤维较细,直径0.2...[阅读全文]

  • [病理室] 免疫组织化学实验中的要点和技巧

    1.固定:最好用4%的多聚甲醛固定液。对于冰冻切片,甲醛固定有时比冰冻丙酮好;但对于不同的组织和抗原,可选用不同的固定液。 有时候商品化的抗体会有比较适合而推荐的固定液,请于购置前注意说明书。 Bouin S固定液:饱和苦味酸750ml,甲醛250ml,冰醋酸5...[阅读全文]

  • [病理室] 免疫组化对照片的作用

    免疫组化染色中的对照片的设置非常重要,它是判断您的染色是否成功的关键依据,而且也是检测每一个抗体的质量标准,常设的对照如下:自身对照、阴性对照(空白对照、替代对照、抑制对照、 吸收实验对照)、阳性对照。 A、自身对照:在同一切片上与检测的目的...[阅读全文]

  • [病理室] 免疫印迹膜上总蛋白的染色

    在确定印迹中是否存在抗原之前,通过对硝酸纤维素膜染色可了解转印至膜上的总蛋白质的组成情况,并可确定蛋白质分子质量标记物的位置和确信转印成功。同时,该方法也清楚地显示出转印蛋白质的复杂性。用于聚丙烯酰胺凝胶染色的常规方法不适用于免疫印迹的染...[阅读全文]

  • [病理室] 报告上说加做免疫组化的原因

    由于免疫组化具有特异性强、灵敏度高、定位准确等特点,且能将形态研究与功能研究有机地结合在一起,所以,这门新技术已被广泛地应用于生物学和医学研究的许多领域。在病理学研究中,免疫组化技术的作用和意义更为重要。以肿瘤研究为例,在免疫组化技术出现...[阅读全文]

  • [病理室] HRP标记抗体的几类方法

    一、戊二醛二步法 1. 原理 戊二醛为一种双功能试剂,通过其醛基分别与酶和免疫球蛋白上的氨基共价结合,形成酶-戊二醛-免疫球蛋白结合物。 2. 标记步骤 (1)称取HRP25mg溶于1.25%戊二醛溶液中,于室温静置过夜。 (2)反应后的酶溶液经Sephadex G-25层析柱...[阅读全文]

  • [病理室] IHC热诱导的抗原修复操作规程

    1.热修复方法 (1)微波法 96~C,10minX2。 (2)直接加温法 100~C,10min。 (3)水浴锅法 100~C,10minx2。 (4)高压锅/消毒锅法 120~C,5min。 (5)真空加热法 10min。 修复方式对结果影响不是很大,主要与修复温度有关,但以微波和水浴锅法较为稳定。 2.热修...[阅读全文]

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