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ALISEI全自动酶免仪的应用体会与技巧

时间:2009-04-04 22:05|来源:实验室前沿收集| 分享|点击:


酶联免疫吸附试验(ELISA)以操作简便、技术可靠、试剂方便易得等优势,在医院实验室中已被广泛应用。特别是从二十世纪九十年代开始,ELISA的灵敏度和特异性以及检测过程的自动化程度得到显著提高和改善,ELISA从而成为检测传染病血清学(病毒性肝炎、艾滋病等)、肿瘤标志物及内分泌等各种临床免疫指标的主要技术。 实验室前沿,了解实验室动态

         随着检验医学的迅速发展,ELISA将更多地参与诊断、治疗及疗效的判断,其技术已从手动、半自动、全自动朝多功能、多用途联用流水线发展,全自动酶免分析仪正在世界各种实验室普及。鉴于以上,我院于2002年12月从意大利SEAC公司购进一台ALISEI全自动酶免分析仪,配以上海科华公司ELISA试剂,经一年的使用、观察与对比,体会如下: copyright sysqy.com

         一、测试程序编辑 实验室前沿,了解实验室动态

         ALISEI提供的英文控制软件,可方便用户针对每项检测项目,按其操作说明简便而具体地进行编程,并可作测试前预稀释工作编辑;并灵活地对操作步骤加以适当地调整(例:上海科华公司提供的检测HEV-IgM和HEV-IgG试剂盒,HEV-IgM加样时只需加50μl血清,而HEV-IgG加样时需100μl样品稀释液和10μl血清,用户可利用软件提供的Disp Regent+┄功能使100μl样品稀释液和10μl血清一步完成,从而使以上两项检测项目的操作步骤达到一致,可以在同一块微孔板进行测试)。另对于两种操作步骤相似的测试项目,用户利用COPY(复制)功能,复制一个源程序并稍加修改,即可得到一个与源程序步骤相似的程序,从而简便了操作程序的编辑。

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         另以上海科华公司生产的乙肝二对半检测试剂(立可读)为例:如果实验室当天的乙肝二对半检测量小于44人份,则占用ALISEI的三块板;如果多于44人份,则占用ALISEI的五块板。笔者将HBsAg的检测程序复制为HBsAg1、 HBsAg2、 HBsAg3,进行人为拼板,即HBsAg-HBsAb为一块板、HBeAg-HBsAg1为一块板,等拼为四块板,这样就可以在占用ALISEI四块板的基础上同一批检测多至68人份的乙肝二对半。

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         二、检测流程图 本文来自实验室前沿

         每天开机后,用户按当天的标本量添加病人资料,软件即自动编辑,进行时间优化管理,最终生成TMS(时间管理系统)图。但有时TMS所提供的流程图并不能使用户满意,用户可以利用软件提供的SWAP(位置互换)功能,对相应的测试项目的检测序号进行互换,以期望得到满意的TMS图。所以建议用户在编辑测试程序时,将步骤繁琐的测试项目序号靠前。 sysqy.com

         三、防止交叉污染 字串6

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         经国家药品监督管理局北京医疗器械质量监督检验中心测试证明:ALISEI的设计携带污染率<1ppm,实际携带污染率<0.1ppm[1]。
         近一段时间发现,每天检测结果中乙肝二对半HBsAg检测板第一、第二板条本底偏高。经仔细观察每天的时间优化管理条带,发现仪器加样针分配好抗HCV酶标二抗后,即进行HBsAg显色剂的分配工作。笔者怀疑是否由于抗HCV酶标二抗的超强附着力引起痕量污染。笔者随即对抗HCV的操作步骤稍加修改:即在加入酶标二抗后,插入两步洗涤液灌注、冲洗加样针程序。经过测试,发现乙肝二对半HBsAg检测板第一、第二板条本底偏高问题已得到解决。 实验室前沿,了解实验室动态


         当然,笔者认为插入的两步灌注、冲洗加样针程序,如果改作第一步为终止液灌注、冲洗,第二步为洗涤液灌注、冲洗,效果将更加明确。从以上实验可以发现,作为检验人员,不能拘泥于全自动分析仪所固有的操作模式,应发挥人的主观能动性,使机器更好地为人服务。 字串2 sysqy.com

         四、读数系统 copyright sysqy.com

         ALISEI采用最先进的8光纤三波长读数,去除测试过程中包括微孔板划痕在内的一切干扰,使结果更准确可靠,最大线性范围OD值可达9.0。 实验室前沿,了解实验室动态

         五、测试项目 字串4

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         ALISEI除了定性试验,还可做定量试验、亲和力试验、过敏原检测等。 本文来自实验室前沿


         六、不足之处 本文来自实验室前沿

         1. ALISEI提供6块板、12个项目同时在线检测,但对于开展多于12个项目检测的实验室就凸显不足。厂方已听取了广大用户的要求,在新提供的控制软件版本中,作出相应修改:可提供6块板、16个项目同时在线检测。

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         2. 由于目前的一些检测项目(例:类风湿因子分型检测)需用OPD(邻苯二胺)显色,而OPD显色液稳定性差,需临时配制,并需要在半小时内应用;而ALISEI在工作时是全封闭进行。若将此类项目用ALISEI检测,势必要在中途将仪器暂停,放入显色液,这将带来诸多麻烦。

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         综上所述,引进ALISEI全自动酶免仪不仅能提高工作效率,还能节约劳动力,使酶免试验的质量管理更加规范,并使ELISA的精密度、灵敏度、特异性同时有所提高,能真正实现酶免实验室的自动化和网络化。 实验室前沿,了解实验室动态

         参考文献:
         [1] ALISEI全自动酶免分析仪质量测试:W(X-040-2001). 国家药品监督管理局北京医疗器械质量监督检验中心. 本文来自实验室前沿

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