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高效液相色谱仪使用维护与保养规程

时间:2010-12-11 00:52|来源:实验室前沿| 分享|点击:


目的:建立岛津LC-10AT型高效液相色谱仪使用、维护与保养规程 实验室前沿,了解实验室动态

范围:LC-10AT型高效液相色谱仪
职责:分析测试中心对本规程的实施负责
正文:
1. 系统组成:本系统由1(或2)个LC-10ATvp溶剂输送泵(常用的HPLC系统为等度洗脱。泵数量为2个时,为梯度洗脱,分主/A泵和副/B泵)、Rheodyne 7725i手动进样阀、SPD-10Avp紫外-可见检测器、N2010色谱数据工作站和电脑等组成,另外还包括打印机、不间断电源等辅助设备。
     2. 准备
     2.1 准备所需的流动相,用合适的0.45μm滤膜过滤,超声脱气20min。
     2.2 根据待检样品的需要更换合适的洗脱柱(注意方向)和定量环。
     2.3 配制样品和标准溶液(也可在平衡系统时配制),用合适的0.45μm滤膜过滤。
     2.4 检查仪器各部件的电源线、数据线和输液管道是否连接正常。
     3. 开机:接通电源,依次开启不间断电源、B泵、A泵、检测器、柱温箱,待泵和检测器自检结束后,打开打印机、电脑显示器、主机,最后打开色谱工作站。 内容来自实验室前沿网站
     3.1 打开检测器的氘灯:在检测器显示初始屏幕时,按[func]键数次,直至显示参数“LAMP”,用数字键输入“1”,按[Enter]键确认。按[CE]键退出到初始屏幕。氘灯预热片刻,即可。(注:用数字键输入“0”,按[Enter]键确认,表示关氘灯)

4. 参数设定
   4.1 波长设定:在检测器显示初始屏幕时,按[func]键,用数字键输入所需波长值,按[Enter]键确认。按[CE]键退出到初始屏幕。
    4.2 流速设定:在A泵显示初始屏幕时,按[func]键,用数字键输入所需的流速(柱在线时流速一般不超过1ml/min),按[Enter]键确认。按[CE]键退出。
     4.3 流动相比例设定:在A泵显示初始屏幕时,按[conc]键,用数字键输入流动相B的浓度百分数,按[Enter]键确认。按[CE]键退出。
    4.4 梯度设定
    4.4.1 在A泵显示初始屏幕时,按[edit]键,[Enter]键;
    4.4.2 用数字键输入时间,按[Enter]键,重复按[func]键选择所需功能(FLOW设定流速,BCNC设定流动相B的浓度),按[Enter]键,用数字键输入设定值,按[Enter]键;

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    4.4.3 重复上一步设定其它时间步骤;
    4.4.4 用数字键输入停止时间,重复按[func]键直至屏幕显示STOP,按[Enter]键。按[CE]键退出。
    5. 更换流动相并排气泡
    5.1 将A/B管路的吸滤器放入装有准备好的流动相的储液瓶中;
    5.2 逆时针转动A/B泵的排液阀180°,打开排液阀;
    5.3 按A/B泵的[purge]键,pump指示灯亮,泵大约以9.9ml/min的流速冲洗,3min(可设定)后自动停止;
    5.4 将排液阀顺时针旋转到底,关闭排液阀。
    5.5 如管路中仍有气泡,则重复以上操作直至气泡排尽。
    5.6 如按以上方法不能排尽气泡,从柱入口处拆下连接管,放入废液瓶中,设流速为5ml/min,按[pump]键,冲洗3min后再按[pump]键停泵,重新接上柱并将流速重设为规定值。
    6. 平衡系统
    6.1 按《N2010色谱数据工作站操作规程》打开“色谱工作站”软件,输入实验信息并设定各项方法参数后,按下“通道A” 按钮。

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    6.2 等度洗脱方式
    6.2.1 按A泵的[pump]键,A、B泵将同时启动,pump指示灯亮。用检验方法规定的流动相冲洗系统,一般最少需6倍柱体积的流动相。
    6.2.2 检查各管路连接处是否漏液,如漏液应予以排除。
    6.2.3 观察泵控制屏幕上的压力值,压力波动应不超过1MPa。如超过则可初步判断为柱前管路仍有气泡,按5.6操作。
    6.2.4 观察基线变化。如果冲洗至基线漂移<0.01mV/min,噪声为<0.001mV时,可认为系统已达到平衡状态,可以进样。
    6.3 梯度洗脱方式
    6.3.1 以检验方法规定的梯度初始条件,按6.2.1及6.2.4项下方法平衡系统。
    6.3.2 在进样前运行1~2次空白梯度。方法:按A泵的[run]键,prog.run指示灯亮,梯度程序运行;程序停止时,prog.run指示灯灭。
    7. 进样
    7.1 进样前按检测器[zero]键调零,按色谱工作站软件中 [调零] 按钮校正基线零点。
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    7.2 用试样溶液清洗注射器,并排除气泡后抽取适量。

本文来自实验室前沿

7.3在梯度洗脱条件下进样,需同时按A泵(或主泵)的[run]键,prog.run指示灯亮,梯度程序运行;等度洗脱则不用。
8. 维护与保养
8.1用于此仪器的所有自配流动相及水均须经过Φ0.22µm的水或有机系膜过滤。
8.2仪器管道系统平时应保存于70﹪甲醇中。
8.3与该项目无关人员未经过允许,不得更改除上述自行设定外的其它参数。
8.4出现异常情况不得擅自检修,应及时上报告以寻求正确的处理办法。

8.5仪器要可靠接地。 copyright sysqy.com

Tags:保养,维护,使用,高效,设定,Enter,流动,系统,屏幕,
责任编辑:何辉

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