有若干种方法常用于提高免疫印迹的灵敏度。一种是在电泳之前应用免疫沉淀法将抗原进行纯化和浓缩(见前)。该法可浓缩极低浓度的抗原,并可在电泳和免疫印迹之前将其与无关的蛋白质分离,使对极低浓度抗原的研究成为可能。提高检测灵敏度的其他方法都是针对增...[阅读全文]
1.准备工作 该检测是在96孔微板上进行,每孔均先用链霉亲合素包被,分别依次加入待进行表位作图的肽系列,并用需定位的抗体检测。 2.试剂和溶液 0.1%PBS-Tween; 2%BsA/PBS; 0.1%(wt/v01)BSA/PBS; 肽; 过氧化物酶标记的第二抗体; TMB底物(取50...[阅读全文]
患有烈性传染病并最终康复者,保护性免疫的持续时间可达60~?o年,有的终身免疫。疫苗接种后(例如天花疫苗),特异性抗体及记忆性细胞也据称可维持数十年。这些都提示,抗原特异性记忆细胞在体内可以长期存在。其中的机制尚未完全阐明,现有的解释包括两个方...[阅读全文]
当免疫组化染色没有出现预期结果时,应系统地查找原因,而每一次只能排除一种可能的原因。 对照/标本无染色 ① 确认是否忽略了应该加的某种试剂,包括一抗、二抗、三抗及底物等。 ② 确认所有的试剂是否按正确的顺序加入,是否孵育了足够的时间。 ③ 对照抗...[阅读全文]
一、非特异性染色的主要因素 组织的非特异性染色的机理很复杂,其产生的原因主要可分为以下几点: (1)一部分荧光素未与蛋白质结合,形成了聚合物和衍化物,而不能被透析除去。 (2)抗体以外的血清蛋白与荧光素结合形成荧光素脲蛋白,可与组织成分结合。...[阅读全文]
近年来,随着微生物基因组学的发展,微生物基因检测迎来了新的机遇。2000年,Makino等已经完成V.p的基因组测序,V.p毒力基因及特异的基因序列得到进一步确定。根据V.p特异基因序列,设计引物,进行PCR检测,是现阶段检测V,p的最快速准确的方法。目前应用...[阅读全文]
(一)检验方法 1.样品采集 以无菌方法采取具代表性的样品,置灭菌的容器内。一般采集患者粪便、呕吐物和中毒的可疑原因食品。常见可疑的食品有鱼、虾、蟹、贝等海产品及其他有关的食品。若上述食品均为煮熟品,也可检验它们的包装物、烹调用具等。 副溶血弧...[阅读全文]
1、肉毒梭菌采样及处理 肉毒梭菌中毒诊断采样,要采取病人或病畜的血清和粪便、可疑食物、饮料或饲料水以及土壤等;如为创伤感染,除可采取血清、粪便外,还可采取创伤局部的渗出液、切除组织等。最好能采得血清10ml以上;食品、饲料、粪样、土壤等25~50g。...[阅读全文]
疾病诊断、细菌鉴定,关键在鉴定毒素。从材料中如能迅速检出毒素为最好,检出速度快,治疗预防能及时。从症状、流行病学怀疑肉毒症后,应先千方百计地在极短时期内证明检材中是否有肉毒梭菌毒素,抢时间救人。在设法证明毒素存在的同时,进行细菌分离、鉴定...[阅读全文]
恙虫病 (tsutsugamushi disease)又称丛林斑疹伤寒,是由恙虫病立克次体经恙螨幼虫叮咬传播的自然疫源性疾...[阅读全文]
免疫电镜技术与光镜免疫细胞化学染色方法的基本原理和试剂准备基本相同,相关内容可参...
配1000ML的0.1 %盐酸乙醇液:蒸馏水 290ml 与无水 乙醇 700 ml 混合后加入浓盐酸 10m...
1.组织处理 恰当的组织处理是做好免疫组化染色的先决条件,也是决定染色成败的内部因...
Kausche等(1939)烟草花叶病毒吸附到金颗粒上,在电镜下观察金离子呈高电子密度。然而...
辛酸提取法该法可用于分离提取人、兔、小鼠血清中的Ig及杂交瘤诱生的腹水和培养上清液...
常规固定液的配制 (1) 10%甲醛液(常规标本用此固定液固定标本) 浓甲醛 10ml 蒸馏...