聚丙烯酰胺凝胶薄片 35 S、 14 C或 3 H的放射活性测定 1.用自显影X线胶片作模板,切下含放射性目的蛋白的凝胶片段,已经干燥但尚未固定的凝胶很容易操作。 2.将凝胶薄片放入放射性计数小瓶中。 3.用最小量的水(20u1/1X 5mm薄片)膨胀凝胶薄片(室温30min)...[阅读全文]
凝胶铜染法是传统的考马斯亮蓝或银染法的替代染色方法。将凝胶在氯化铜(CuCl2)溶液中温育,在Tris和SDS同时存在时可形成明显的白色不透明沉淀物。蛋白条带仍然清晰,留下一个多肽分离模式的负染图像。蛋白未结合在凝胶上,可通过EDTA螯合剂去除Cu离子而得以...[阅读全文]
凝胶固定法 在很多实验中,电泳分离的蛋白质需要将其沉淀或结合在凝胶内,这类技术统称为固定。各种浓度和厚度的凝胶都可用酸或醇类固定。通常是在室温下将凝胶浸入12.5%三氯乙酸或脱色剂(70%乙酸和25%的甲醇)内。如果用溴酚蓝作为示踪剂,它亦可作为pH...[阅读全文]
1.应用于病毒感染的诊断 目前PCR技术已开始用于甲、乙、丙、戊型肝炎病毒、人类免疫缺陷病毒、巨细胞病毒、乳头瘤病毒、单纯疱疹病毒、风疹病毒、狂犬病毒、EB病毒以及柯萨奇病毒等所引起人类感染病的诊断。如乙型肝炎病毒(HBV)感染,通常采用的反向血凝法...[阅读全文]
在蛋白质的提纯方法中,选择性吸附也是应用历史较久迄今仍在广泛采用的方法之一。早期工作常用高岭土(我国的一种土质,其分子式大致是AL2O32SiO22H2O)、氧化铝(AL2O3)及活性炭等吸附剂,由于这些吸附剂吸附力较弱,或者易引起蛋白质变性而应用不广,现已...[阅读全文]
血清的检查主要有两种,一种是非梅毒抗体的检查法则所谓性病研究实验室检验法(简称为VDRL);另一种是针对梅毒螺旋体的特定抗体来检查,称之为螺旋体试验(简称TPHA)和萤光抗体吸附试验法(FTA─ABS)以上三种方法(VDRL ,TPHA ,FTA─ABS)对各期梅毒的敏感度都不...[阅读全文]
AFLP技术是一项新的分子标记技术,是基于PCR技术扩增基因组DNA限制性片段,基因组DNA先用限制性内切酶切割,然后将双链接头连接到DNA片段的末端,接头序列和相邻的限制性位点序列,作为引物结合位点。限制性片段用二种酶切割产生,一种是罕见切割酶,一种是...[阅读全文]
DNA重组技术(或基因工程)是20世纪生物学的伟大成就,并已渗透到生命科学包括医学 各个领域,为肿瘤的实验研究和临床诊断及治疗提供了崭新的技术和有用的工具。本附录扼要介绍在分子肿瘤学领域中常用的分子生物学基本技术及其在肿瘤研究中的应用,着重介绍...[阅读全文]
需要的器材和试剂 L8M Beckman超速离心机或与其相当的机型 吊桶式SWTi4l转头或相当类型 氯化铯(Sigma) PBS 纯化的噬菌体样本 使用方法 1.在每毫升最后的噬菌体悬液(例如来自实验方案13.11)中,加入0.45 g氯化铯,充分混匀至溶解。 2.用吊桶式转头 (或与...[阅读全文]
1. 实验原理 在PH9.2-9.8的缓冲溶液中,细胞中的碱性磷酸酶能将底物磷酸苯酚钠水解,生成 -苯酚和磷酸钠,再以稳定的重氮盐与酚偶联成不溶性有色偶氮染料沉淀于胞浆中。 2. 标本采集 2.1 病人准备:了解病人是否对局麻药有过敏史,凝血因子严重缺陷引起的出...[阅读全文]
免疫电镜技术与光镜免疫细胞化学染色方法的基本原理和试剂准备基本相同,相关内容可参...
配1000ML的0.1 %盐酸乙醇液:蒸馏水 290ml 与无水 乙醇 700 ml 混合后加入浓盐酸 10m...
1.组织处理 恰当的组织处理是做好免疫组化染色的先决条件,也是决定染色成败的内部因...
Kausche等(1939)烟草花叶病毒吸附到金颗粒上,在电镜下观察金离子呈高电子密度。然而...
辛酸提取法该法可用于分离提取人、兔、小鼠血清中的Ig及杂交瘤诱生的腹水和培养上清液...
常规固定液的配制 (1) 10%甲醛液(常规标本用此固定液固定标本) 浓甲醛 10ml 蒸馏...