免疫细胞化学(immunocytochemistry, ICC) 是利用抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂 (荧光素、酶、金属离子、同位素) 显色来确定细胞内抗原的成分(主要是多肽和蛋白质),对其进行定位、定性及定量的研究。 对抗原和抗体的要求 *具...[阅读全文]
当用纯化抗原进行选择时,评价所选择抗体的最佳方法是在高通量滴定模式下进行酶联免疫吸附试验(ELISA)。虽然这也许与抗体最终使用无关,但它提供了一个起始的筛选实验方案,能够让续后的分析集中在有希望的抗体上。大多数噬菌粒展示载体的设计容许进行两种EL...[阅读全文]
1.酶标直接法和间接法 Nakane(1966)将辣根过氧化物酶(HRP) 标记在抗体免疫球蛋白分子上,创建了酶标记免疫组化的直接法、间接法和桥法。 2.PAP法 Stemberger(1969)在酶桥法的基础上,建立了非标记抗体法,先将HRP免疫兔、羊或鼠,制成抗HRP抗体,再与HRP结...[阅读全文]
1.烤片 烤片的目的是将带有蜡的组织切片牢固地黏在载玻片上,以免染色过程中切片脱落。切片在5660℃的恒温箱中至少放置1小时才能达到此目的,但是,通常的烤片温度为;8~60℃,时间为26小时。由于高温干燥可加速组织中抗原的氧化,因此高温烤片对抗原有破...[阅读全文]
电镜组织化学技术是在光镜组织化学基础上发展起来的形态学研究技术,它将组织化学与电镜技术相结合,使组织化学研究从光镜微细结构水平发展到电镜超微结构水平。电镜组织化学技术将组织细胞中特定的化学成分通过特定的化学反应形成反应产物,然后使其形成电...[阅读全文]
在两种或两种以上荧光素之间,如果荧光发射峰很近,那么荧光光谱彼此会有部分重叠,检测时可能出现一种荧光素的信号扩散到另一荧光通道的情况。这种现象称为串色或荧光光谱交叉(crosstalk)。避免或排除光谱交叉干扰的方法通常有以下几种: (1)使用几种荧光素...[阅读全文]
在一般的概念里,ELISA技术的可操作性强,不需复杂设备,甚至完全手工加样、洗板和肉眼判读结果,便可完成该技术的操作。随着人们对质量控制意识的加强,尽可能做到最低限度的减少系统误差,以及减少劳动强度等观念的不断改进,解决ELISA技术中加样、温育、...[阅读全文]
广州管圆线虫病(angiostrongyliasis cantonensis)是由广州管圆线虫(angiostrongyliasis cantonensis)幼虫在人体内移行,侵犯中枢神经系统引起的嗜酸粒细胞增多性脑膜炎或脑膜脑炎。本病的主要特征是脑脊液中嗜酸粒细胞显著升高。该病主要病变是由虫体移行所...[阅读全文]
HCG 是胎盘合体滋养层细胞所分泌的一种糖蛋白激素,它的主要功能是:维持黄体及降低母体淋巴细胞的活动,防止对胎儿的排斥反应。HCG结构中包括、两个亚基,亚基与LH、FSH、TSH近似,尤其是与LH有较大的免疫交叉反应,链为其独有,亚基被用来制备特异性抗体测...[阅读全文]
* 全程佩戴一次性手套。皮肤经常带有 细菌 和霉菌,可能污染 RNA 的抽提并成为 RNA 酶的来源。培养良好的微 生物 实验操作习惯预防 微生物 污染。 * 使用灭菌的,一次性的塑料器皿和自动吸管抽提 RNA ,避免使用公共仪器所导致的 RNA 酶交叉污染。例如,使用...[阅读全文]
免疫电镜技术与光镜免疫细胞化学染色方法的基本原理和试剂准备基本相同,相关内容可参...
配1000ML的0.1 %盐酸乙醇液:蒸馏水 290ml 与无水 乙醇 700 ml 混合后加入浓盐酸 10m...
1.组织处理 恰当的组织处理是做好免疫组化染色的先决条件,也是决定染色成败的内部因...
Kausche等(1939)烟草花叶病毒吸附到金颗粒上,在电镜下观察金离子呈高电子密度。然而...
辛酸提取法该法可用于分离提取人、兔、小鼠血清中的Ig及杂交瘤诱生的腹水和培养上清液...
常规固定液的配制 (1) 10%甲醛液(常规标本用此固定液固定标本) 浓甲醛 10ml 蒸馏...