【 目的 】 保证 ELISA检测结果准确可靠, 充分发挥其方法学的优点。 【 该 SOP变动程序 】 本标准操作程序的变动,可由任一使用本 SOP的工作人员提出,并报经下述人员批准签字:专业主管、科主任。 【 方法 】 【 分析前质控 】 1. 人员培训 实验是人操作的...[阅读全文]
AIDS实验室检查 (1)主要是中度以上细胞免疫缺陷包括:CD4+T 淋巴细胞耗竭:T淋巴细胞功能下降,外周血淋巴细胞显著减少,CD4;200/l,CD4/CD8;1.0,(正常人为1.25~2.1),迟发型变态反应皮试阴性,有丝分裂原刺激反应低下。 (2)B淋巴细胞功能失调:多克隆性高...[阅读全文]
如果不使用化学发光物,推荐用此法对印迹膜染色(Hancock和Tsang 1983)。该法价廉、可靠、灵敏并可得到永久记录,特别适用于放射性标记抗体的染色。更重要的是它不影响后续抗体与抗原的结合(Glenneyl986)。若需复染印迹膜时,应首选此法。但由于有色反应产物...[阅读全文]
抗原抗体复合物的形成是免疫沉淀中最简单的步骤。将抗体加入抗原溶液中,与其相应的抗原结合,然后加入蛋白A或蛋白G微球,混匀。不与微球结合的蛋白质被洗去。加入的抗体量,免疫沉淀的终体积以及是否使用蛋白A或蛋白G视其需要而异。 1.抗体的用量 尽管测定...[阅读全文]
ChIP是目前确定与特定蛋白结合的基因组区域或确定与特定基因组区域结合的蛋白质的最好方法(见下图),也可用于分析与转录、有丝分裂或DNA损伤相关的发生改变的组蛋白修饰。ChIP技术和芯片技术的结合有利于确定全基因组范围内染色体蛋白的分布模式以及组蛋白...[阅读全文]
摘要 用第三代化学发光免疫分析夹心法,评估化学发光检测TSH的实验性能。结果显示该法精密度:批内与批间CV分别为2.08~2.74%与3.85~4.43%。回收率100.6%,灵敏度0.01 mIU/L,交叉污染率<0.01%,与RIA法对比试验Y=0.8942X+0.2031(r=0.9867)。因此,化学...[阅读全文]
实际上,从免疫亲和层析柱上洗脱抗原很快且较容易。大多数工作是花费在设计和用于摸索各种有效的洗脱条件。可以采用三种方法进行洗脱,以阻断抗原抗体之间的相互作用:①用较强烈的条件处理;②加入模拟结合位点的饱和量小分子化合物,和/或③使用一种能引...[阅读全文]
免疫金银染色(immunogold silver staining;IGSS)的基本原理是通过免疫反应沉积在抗原位置的胶体金颗粒起着一种催化剂作用,用对苯二酚还原剂将银离子(Ag+)还原成银原子(Ag),被还原的银原子围绕金颗粒形成一个银壳,银壳一旦形成本身亦具有催化作用,从而使...[阅读全文]
(一)石蜡切片IGSS (1)切片脱蜡至水。 (2)0.1%胰蛋白酶37℃消化20min或抗原修复20min(98℃),自然冷却至室温。 (3)0.05mol/L(pH7.4)TBS洗33min。 (4)l%EA(卵蛋白)15min,不洗。 (5)适当稀释的特异抗体室温4h或4℃孵育20h,或37℃孵育1h。 (6)0.05m01/L(...[阅读全文]
免疫金银染色方法敏感、简便、省时、安全可靠,葡萄球菌A蛋白(SPA)金标记四步法是在此基础上发展起来的更为敏感的一种新方法。SPA和许多哺乳类动物IgG具有亲和性,且它们之间的连接不会干扰抗原抗体的结合。简单的SPA金标记二步法后,第三步用抗SPA与SPA金表...[阅读全文]
免疫电镜技术与光镜免疫细胞化学染色方法的基本原理和试剂准备基本相同,相关内容可参...
配1000ML的0.1 %盐酸乙醇液:蒸馏水 290ml 与无水 乙醇 700 ml 混合后加入浓盐酸 10m...
1.组织处理 恰当的组织处理是做好免疫组化染色的先决条件,也是决定染色成败的内部因...
Kausche等(1939)烟草花叶病毒吸附到金颗粒上,在电镜下观察金离子呈高电子密度。然而...
辛酸提取法该法可用于分离提取人、兔、小鼠血清中的Ig及杂交瘤诱生的腹水和培养上清液...
常规固定液的配制 (1) 10%甲醛液(常规标本用此固定液固定标本) 浓甲醛 10ml 蒸馏...