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  • [免疫室] 用ELISA来定量测定结合的噬菌体

    器材和试剂 洗涤缓冲液 结合缓冲液 辣根过氧化物酶(HRP)连接的抗M13单克隆抗体(mAb) (Amersham Biosciences) HRP底物㈠OPD(邻苯二胺,o-phe-nylenediamine) (Sigma)或ATBS 【2,2-连氮基-双-(3-乙基苯并噻吡咯啉-6-磺 酸),2,2-azinobis(3-ethylbenzothiazo...[阅读全文]

  • [免疫室] DNA序列的分析

    DNA序列分析是从噬菌体展示的蛋白质或多肽文库中,鉴定出优化的变异体的首选方法。在DNA水平或翻译后(氨基酸序列)水平进行序列比对都是很有用的。 1 测序的时机 在当代全自动DNA测序仪的帮助下,很多克隆的全序列(可读框)都可以在大约几小时内得到。我们通常...[阅读全文]

  • [PCR室] 实时定量PCR体系的优化

    实时定量PCR体系的优化 1.基本参数的优化: 1)MgCl2的浓度:在PCR反应中,MgCl2的浓度对酶的活性是至关重要的,不仅如此,合适的MgCl2的浓度还能在反应中得到较低的Cp(crossingpoint)值(指PCR达到指数扩增期时,产生一定的荧光高于背景并为仪器所识别时的...[阅读全文]

  • [免疫室] 操作因素对ELISA结果的影响

    ELISA操作步骤复杂,操作不当将引起较大的误差。以下叙述各个步骤中的影响因素。 1.加样 加样器是一种比较精密的工具,其在长时间使用时会因机械磨损或者推动杆内附着血痂等原因造成加样不准,尤其是对于样本量较大的临床实验室,因此必须定期对加液器进行维...[阅读全文]

  • [试剂配制] 纤维素增稠剂的作用

    纤维素增稠剂是一种最重要的水性涂料流变助剂。尽管纤维素不溶于水,但通过化学反应,它可以溶于水。最有名的纤维素增稠剂包括: 羟乙基纤维素: HEC 羟丙基甲基纤维素: HPMC 羧甲基纤维素: CMC 乙基羟乙基纤维素: EHEC 纤维素分子是一种高分子链,包括多...[阅读全文]

  • [免疫室] 利用辛酸提取纯化多克隆抗体技术

    辛酸提取法该法可用于分离提取人、兔、小鼠血清中的Ig及杂交瘤诱生的腹水和培养上清液中McAb。 【材料和试剂】 (1)正辛酸。 (2)60mmol/L,pH4.0醋酸缓冲液,PBS。 (3)透析袋。 (4)高速低温离心机。 【操作步骤】 (1)将待提取样品用60mmol/L,pH4.0...[阅读全文]

  • [免疫室] (免疫球蛋白)抗体的三代制备技术

    抗体是机体在抗原刺激下所产生的特异性球蛋白,所以又称为免疫球蛋白(Ig)。特异性抗体是免疫应答中的重要产物,因此亦是免疫学实验中常用的试剂,对于抗原的分析鉴定和定量检测极为重要,在各种免疫学诊断和治疗中应用极为广泛。 传统的方法制备的抗体是用...[阅读全文]

  • [病毒与微生物室] 细菌性阴道炎实验室检查及取样

    【原理】 细菌性阴道病由于阴道正常菌群的生态平衡发生紊乱,优势菌群乳酸杆菌减少或消失,使阴道的厌氧菌和加特纳菌大量生长繁殖,导致胺类和氨增加,使阴道分泌物PH值增高,厌氧菌的代谢产物腐胺、尸胺和三甲胺使阴道分泌物具有鱼腥样气味。由于相关病原体...[阅读全文]

  • [免疫室] 细胞膜的凋亡检测原理

    在正常细胞中,磷脂酰丝氨酸只分布在细胞膜脂质双层的内侧,细胞发生凋亡早期,膜磷脂酰丝氨酸(PS)由脂膜内侧翻向外侧。Annexin V是一种磷脂结合蛋白,与磷脂酰丝氨酸有高度亲和力,故可通过细胞外侧暴露的磷脂酰丝氨酸与凋亡早期细胞的胞膜结合。因此Anne...[阅读全文]

  • [病毒与微生物室] 微生物的共同特点

    微生物作为生物,具有与一切生物的共同点,即遗传信息都是由DNA链上的基因所携带,除少数特例外,其复制、表达与调控都遵循中心法则;初级代谢途径如蛋白质、核酸、多糖、脂肪酸等大分子物的合成途径基本相同;微生物的能量代谢都以ATP作为能量载体。 微生物...[阅读全文]

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