同体内浆细胞一样,杂交瘤细胞将抗体分泌入组织培养上清液中,收集这些上清液,就可以应用到大多数标准的免疫实验中。 1.杂交瘤组织培养上清液应通过加入1/20的lmol/L Tris(pH 8.0)调节其缓冲度; 杂交瘤组织培养上清液 413下1000g离心5minl去除杂交瘤细...[阅读全文]
尘埃粒子(激光尘埃粒子计数器、采样管)、沉降菌【高压消毒锅、恒温培养箱、放大镜、培养皿(一般采取 90mm15mm的硼硅酸玻璃培养皿)、普通肉汤琼脂培养基】、照度计。...[阅读全文]
检测范围大约为每个细胞表达1 00010 000个抗原分子。 一、特点 快速简便;检测抗原的存在及定位;定性,半定量;灵敏度依赖于抗原量及位置;高浓度抗原,用低亲和力抗体也能检测。 二、操作步骤 (1)在细胞染色前将盖玻片灭菌处理,将圆形盖玻片(广或1.5*)置...[阅读全文]
1.对心肌具有高度特异性,在心肌中具有高浓度,而在其他组织中不存在或极少; 2.在心肌损伤时能够迅速、大量地释放到血液中,从而保证可以早期、灵敏的诊断AMI; 3.其异常可以在血液中持续较长时间、稳定,利于检测; 4.测定时间短、费用低廉。 目前尚没有一...[阅读全文]
表现出的酶GUS可以水解其基质衍生物 p NPG,所产生的黄色生成物 p -nitrophenol,可供活性测定 (Jefferson et al, 1986); 仪器用具:ELISA光计 (Dynatech);微滴定盘 (microtiter plate, Nunc F96 Maxisorb 442404) 药品试剂:基质溶液 (GUS reaction buffe...[阅读全文]
可用作ELISA测定的标本十分广泛,体液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、粪便)等均可作标本以测定其中某种抗体或抗原成份。有些标本可直接进行测定(如血清、尿液),有些则需经预处理(如粪便和某些分泌物)。大部分ELISA检测均以血清为标本。...[阅读全文]
非Jo1 aS与Jol抗体有着相似的临床意义。当患者具有肌无力,CPK升高及相应的肌电图特征时,aS阳性可排除其他肌肉疾病,为PM或DM诊断提供有力支持。10%的PM/DM患者肌肉活检为阴性表现,此时如排除甲状腺疾病,aS阳性则可做出PM/DM诊断。aS对PM诊断特别有帮...[阅读全文]
常用的检测方法为IIF、ELISA和蛋白质印迹法。IIF法的荧光特征同抗核糖体抗体。胃主细胞强着染,胃壁细胞阴性;肾近曲、远曲小管均匀着染。但是IIF法常常会导致P蛋白抗体漏检,30%~60%的P蛋白抗体能产生典型的抗核糖体抗体的荧光图形。 ELISA、蛋白质和放...[阅读全文]
蛋白质经SDS-PAGE后,胶片浸入转印缓冲液,蛋白质可被转印到硝化纤维纸(nitrocellulose) 上,先经素洗去SDS,并使蛋白质回原态抗原性,可使用抗体进免疫染色 (Towbin et al, 1979)。 仪器用具:电泳转印槽 (Hoefer Transphor TE 52):转印槽 (可容纳4 个转印...[阅读全文]
提高免疫组织化学敏感性的辅助手段方法 (1)蛋白酶消化蛋白酶消化可以去除覆盖于抗原决定簇表面的杂蛋白,更为重要的是因甲醛固定而引起的交联被打开,有利于抗原抗体的结合,提高阳性检测率。 (2)抗原修复选择适宜的修复液(pH值、离子浓度)、修复方式、温度...[阅读全文]
免疫电镜技术与光镜免疫细胞化学染色方法的基本原理和试剂准备基本相同,相关内容可参...
配1000ML的0.1 %盐酸乙醇液:蒸馏水 290ml 与无水 乙醇 700 ml 混合后加入浓盐酸 10m...
1.组织处理 恰当的组织处理是做好免疫组化染色的先决条件,也是决定染色成败的内部因...
Kausche等(1939)烟草花叶病毒吸附到金颗粒上,在电镜下观察金离子呈高电子密度。然而...
辛酸提取法该法可用于分离提取人、兔、小鼠血清中的Ig及杂交瘤诱生的腹水和培养上清液...
常规固定液的配制 (1) 10%甲醛液(常规标本用此固定液固定标本) 浓甲醛 10ml 蒸馏...