制备胶体金的方法很多，提前准备好工作真是 智者无敌 ，其中应用较为广泛的是还原法，而分散法和其他凝聚法都不合乎要求。还原法的基本原理是在氯化金溶液中加入一定量的还原剂，使金离子还原为金原子。在医学研究中最常用的还原剂有白磷、乙醇、过氧化氢、...[阅读全文]

免疫金银染色方法敏感、简便、省时、安全可靠，葡萄球菌A蛋白(SPA)金标记四步法是在此基础上发展起来的更为敏感的一种新方法。SPA和许多哺乳类动物IgG具有亲和性，且它们之间的连接不会干扰抗原抗体的结合。简单的SPA金标记二步法后，第三步用抗SPA与SPA金表...[阅读全文]

1．烤片 烤片的目的是将带有蜡的组织切片牢固地黏在载玻片上，以免染色过程中切片脱落。切片在5660℃的恒温箱中至少放置1小时才能达到此目的，但是，通常的烤片温度为；8～60℃，时间为26小时。由于高温干燥可加速组织中抗原的氧化，因此高温烤片对抗原有破...[阅读全文]

辛酸提取法纯化多克隆抗体该法可用于分离提取人、兔、小鼠血清中的Ig及杂交瘤诱生的腹水和培养上清液中McAb。 【材料和试剂】 （1）正辛酸。 （2）60mmol/L，pH4.0醋酸缓冲液，PBS。 （3）透析袋。 （4）高速低温离心机。 【操作步骤】 （1）将待提取样品用6...[阅读全文]

串联亲和纯化技术 酵母双杂交技术用于研究蛋白质蛋白质间的相互作用，但由于其筛选步骤复杂、假阳性结果较多、难于量化，以及不易研究高级复合物间的相互关系，故远远不能满足大规模蛋白质组研究的需要，因此，与质谱联用的蛋白质纯化技术已成为当前蛋白质组...[阅读全文]

荧光(fluorescence)是某些物质被一定波长的光(如紫外光)照射后能发射出一种比激发光更长的光。光的吸收具有高度选择性，即一定能量的光量子辐射，只能被一定结构的物贡分子或原子所吸收，如石英玻璃几乎不吸收可见光，但有较强的吸收红外光作用。利用物质对...[阅读全文]

一、 非特异性染色的识别 常出现在组织边缘、胶原纤维及血浆渗出处，坏死组织及固定不良的组织中心处。表现为弥漫性，均匀性的背景染色。也可以是随机分布的阳性反应产物点、团或块状。 二、 非特异性染色的原因 1. Ig与Fc受体结合 多见于冰冻切片（特别是淋...[阅读全文]

免疫荧光单标记方法 免疫荧光单标记是指只标记一种蛋白质分子，方法比较简单，只要按照染色步骤去做，通常不存在太多的问题。但要注意固定液的选择，固定液选择的合适与否，可能会直接影响染色结果。具体染色方法如下。 1)所需材料与试剂 (1)培养在盖玻片或...[阅读全文]

1．新鲜组织或在-80℃保存的组织用恒冷箱冰冻切片机切片，厚度为10～40gm； 2．将切片裱于载玻片上，立即用电吹风吹干或室温放置30分钟，如不能及时染色，密封后一20℃保存； 3．染色前组织切片用冷丙酮4℃固定1020分钟，PBS洗2次，每次5分钟； 4。必要时应...[阅读全文]

1．烤片 烤片的目的是将带有蜡的组织切片牢固地黏在载玻片上，以免染色过程中切片脱落。切片在5660℃的恒温箱中至少放置1小时才能达到此目的，但是，通常的烤片温度为；8～60℃，时间为26小时。由于高温干燥可加速组织中抗原的氧化，因此高温烤片对抗原有破...[阅读全文]