微生物培养用固体培养基分离纯培养 单个微生物在适宜的固体培养基表面或内部生长、繁殖到一定程度可以形成肉眼可见的、有一定形态结构的子细胞生长群体,称为菌落( colony )。当固体培养基表面众多菌落连成一片时,便成为菌苔( lawn )。不同微生物在特定...[阅读全文]
由于当前对甲醛固定组织会发生什么样的化学反应,尤其是对蛋白质的立体构象会产生什么样的影响尚不十分清楚,因而,导致对抗原修复的机制也不十分清楚。可能的机制可归纳如下三条。 第一,由于甲醛固定可使蛋白与甲醛、蛋白与蛋白、蛋白与核酸之间通过甲基之...[阅读全文]
当FITC在碱性溶液中与抗体蛋白反应时,主要是蛋白质上赖氨酸的r氨基与荧光素的硫碳胺键(thiocarbmide)结合,形成FITC-蛋白质结合物,即荧光抗体或荧光结合物。一个IgG分子中有86个赖氨酸残基,一般最多能结合15~20个,一个IgG分子可结合2~8个分子的FITC,...[阅读全文]
补体C4溶血活性的测定(试管法) 将豚鼠血清用水合肼或氨水处理去除其中的C4,这种C4缺乏血清(简称R4)不能使致敏的SRBC溶解,当加入含有C4的受检血清后,级联酶促反应发生即可导致致敏的SR,BC溶解。溶血的程度与待测血清中C4的活性相关。 1.无补体C4-抗原抗...[阅读全文]
寡核苷酸的纯化过程在DNA全自动合成仪上是自动进行的,但也有以下几种手工方法可以选择。 1.NAP柱纯化 由Pharmacia公司生产,主要成分为SephadexG-25,经特殊处理后装成不同体积的小柱,常用的有NAP-10。含寡核苷酸片段的氨水溶液,调整体积为lml加样于NAP-...[阅读全文]
电泳是通过电场作用将C4迁移率不同的同种异型分离开,然后依照分型标准定型。在某些情况下,C4A某种同种异型与C4B某种同种异型迁移率相同不易区分开,此时可用溶血覆盖技术加以区别。 1.原理 用肼处理豚鼠血清,可灭活其补体成分C4,使之成为帜缺乏的血清。...[阅读全文]
羊水中存在ABH(O)血型物质,故可在妊娠期预测胎儿的血型,以便对母体胎儿血型不合者进行围生期监护、治疗和对新生儿的作好抢救准备。 一、ABH分泌型血型的预测 本试验是根据羊中分泌的血型物质可将相应抗血清中抗体中和原理设计的。将羊水与0.2毫升最适稀...[阅读全文]
1.准备工作 蛋白A或蛋白G微珠混悬液可在用前准备,4℃保存于含叠氮钠的溶液中。 2.所需溶液和特殊设备 裂解缓冲液、抗体、蛋白A或蛋白G微球(用含0.02%叠氮钠裂解缓冲液配成10%(V/V)的混悬液,4℃保存)、不含DTT的Laemmli样品缓冲液(2%SDS、10%甘油、...[阅读全文]
制备表达标记蛋白的细胞提取物,以进行SDS凝胶电泳。抽提物可为宿主细胞系统的可溶性蛋白提取物,或是其总蛋白提取物。在样品缓冲液中抽提物蛋白的浓度不应超过10mg/ml。选择适当的SDS聚丙烯酰胺凝胶浓度配方,使其在标记蛋白的预计分子量范围之内,可较好...[阅读全文]
1.血型测定的错误 血型检测时因患者红细胞悬液浓度过低或离心时间太短(未做反定型检测),又只用肉眼观察结果,使之在血型抗原较弱的情况下,微弱、细小的凝集未看到,而造成定型报告错误。 2.检验者工作粗心的错误 (1)在血型检测时,由于试管上未编号,...[阅读全文]
免疫电镜技术与光镜免疫细胞化学染色方法的基本原理和试剂准备基本相同,相关内容可参...
配1000ML的0.1 %盐酸乙醇液:蒸馏水 290ml 与无水 乙醇 700 ml 混合后加入浓盐酸 10m...
1.组织处理 恰当的组织处理是做好免疫组化染色的先决条件,也是决定染色成败的内部因...
Kausche等(1939)烟草花叶病毒吸附到金颗粒上,在电镜下观察金离子呈高电子密度。然而...
辛酸提取法该法可用于分离提取人、兔、小鼠血清中的Ig及杂交瘤诱生的腹水和培养上清液...
常规固定液的配制 (1) 10%甲醛液(常规标本用此固定液固定标本) 浓甲醛 10ml 蒸馏...