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  • [免疫室] AP融合蛋白的构建方法

    提供了一种相对快速的、定性的比较不同底物相对酶解效率的替代方法。这种方法需要将底物序列展示于一个融合蛋白之中,此融合蛋白与筛选过程中使用的是同样的融合蛋白。之后,从融合蛋白中酶切下来的产物还可以通过N端测序分析得到易断裂键的序列。以碱性磷酸...[阅读全文]

  • [免疫室] 利用噬菌体上清和人血清进行ELISA

    器材和试剂 ● 多孔板 (Immuno plate Maxisorp, Nuric) ● 包被缓冲液 (50mmol/L NaHC0 3 , pH 9.6,0.05%硫柳汞) ● 单克隆抗体(mAb)57D1。该抗体 能识别M13噬菌体次要衣壳蛋白(pⅢ)的N末端。它是用M13噬菌体 颗粒免疫大鼠而获得的。来自含57D1 杂交瘤...[阅读全文]

  • [免疫室] 小规模制备噬菌体上清

    [器材和试剂] ● 噬菌体缓冲液 ● XLl-Blue TB细胞 ● LB-琼脂培养基+Amp/G1u平板 ● LB+Amp; ● M13K07辅助噬菌体(Amersham Biosciences) 、 ● IPTG [方法] 1.用巴氏吸管从单个噬菌斑中挑取噬菌体,并转移到装有200ul噬菌体缓冲液的微量管中。 2.70℃加...[阅读全文]

  • [免疫室] 抗高尔基体抗体的检测技术及临床意义

    抗高尔基体抗体检测方法 (1)间接免疫荧光法:GAA具有特殊的荧光模式:细胞质的核周围两端甚至一端,出现大小不均的颗粒型着染,如帽形,细胞分裂期阴性。常用抗原载体为Hep2细胞,而鼠肝、,肾或胃冷冻切片易漏检。小脑冷冻切片中的浦肯野细胞(Yo)是高尔基体...[阅读全文]

  • [免疫室] MPO-ANCA的检测技术及临床意义

    检测方法 以乙醇固定的白细胞采用间接免疫荧光法(11F)检测ANCA时,标本中淋巴细胞的存在十分重要,能帮助区分抗核抗体与ANCA(ANCA在淋巴细胞中不着染)。当ANA和抗MPO同时存在时,用多聚甲醛固定的中性粒细胞也可区分ANA和抗MPO抗体。此时ANA仍为核着染,而MP...[阅读全文]

  • [免疫室] 蛋白A—金(PAG)放大方法

    为了得到更明确的染色结果,在用IGS方法定位细胞抗原时可采用搭桥法,使IGS得到放大,这里介绍一种用抗A蛋白抗体作桥的PAG放大法。由于抗蛋白A抗体既能通过Fab段又能通过Fc段与PAG上的蛋白A结合,因此与其他桥抗体相比,它能够在抗原位点处聚集更多的胶体金...[阅读全文]

  • [免疫室] 前列腺特异性抗原(PSA)测定操作规程

    原理 前列腺特异性抗原(PSA)试剂盒应的是双抗体夹心法检测血清PSA含量,抗体是针对不同抗原决 定蔟的两株单克隆抗体,标记酶为HRP,显色系统为TMB。在检测浓度范围内,血清PSA含量与酶反应显 标本采集与处理 病人标本无需特殊制备处理,采用正确医用技术收...[阅读全文]

  • [免疫室] ELISA常用结果判定的方法

    1.定性测定 (1)阳性判定值法(cut-off value,CO值):一般为阴性对照的平均A值加一个常数,试剂制备严格标准化,要先计算出阳性对照A值平均数和阴性对照A值平均数。标本A值CO值即为阳性。 (2)抑制率法:在竞争抑制法中结果可用抑制率表示。 抑制率(%)=(A阴...[阅读全文]

  • [免疫室] 人类免疫缺陷病毒检测操作规范

    获得性免疫缺陷综合征(acquired immuno-deficiency syndrome)简称为艾滋病(AIDS),本病是以机会性感染及机会性肿瘤为特征的慢性传染...[阅读全文]

  • [免疫室] 记忆性T细胞长期维持的机制

    患有烈性传染病并最终康复者,保护性免疫的持续时间可达60~?o年,有的终身免疫。疫苗接种后(例如天花疫苗),特异性抗体及记忆性细胞也据称可维持数十年。这些都提示,抗原特异性记忆细胞在体内可以长期存在。其中的机制尚未完全阐明,现有的解释包括两个方...[阅读全文]

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