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腺苷脱氨酶测定完整操作规程示例

时间:2011-09-25 22:56|来源:实验室前沿| 分享|点击:


【方法与原理】

试剂中的腺苷受样本中腺苷脱氨酶(ADA)催化水解生成次黄苷和氨,前者在PNP等物质作用下生成次黄嘌呤,次黄嘌呤在黄嘌呤氧化酶作用下生成尿酸和H2O2,H2O2与4-AA、TBHBA在过氧化物酶作用下生成醌亚氨化合物,通过测定546nm波长处吸光度变化值得出样本中ADA活性。  
【标本要求】
1.     样品为空腹不溶血血清。样品中ADA在4℃密封保存可稳定1小时。
2.     请勿使用氟化物防腐的血清和肝素胺抗凝的样本。
【仪器】
Olympus AU640 全自动生化分析仪                  
【试剂及配套品】
1.试剂厂商:伊利康
2.试剂:试剂1 50mmol/LGood’S缓冲液、大于1KU/L嘌呤核苷磷酸化酶、大于1KU/L黄嘌呤氧化酶、大于2KU/L过氧化物酶、1mmol/LTBHBA、大于1KU/L抗坏血酸氧化酶
       试剂2 50mmol/L Good’S缓冲液、12mmol/L腺苷、2mmol/l4-氨基安替比林
3.试剂稳定性:试剂盒应贮存于2-8避光条件下,有效期为12个月;试剂不可冰冻。
4.质控品:朗道质控液
5.校准品:厂家配套校准品
【参数设置】
1. Sample vol: 6.0 uL     Dil vol:0 uL       Pre-Dilution Rate:1
2. Reagent 1 vol:225 uL   Dil vol:0 uL
3. Reagent 2 vol:75 uL    Dil vol:0 uL
4. wavelength Pri:540    Sec:700
5. Point Fst:22   Lst:27
6. Method:RATE Reaction:+
7. Linearity:15%
8. Lag Tine:Yes
9. Min OD:-2.0000 Max OD:2.5000
10.Reagent OD Limit:
 FirstL-2.0000   FirstH2.5000     LastL-2.0000    LastH2.5000
11.Dynamic range: L0.0   H500.0
12.Cal type:Serum
13.Correiation factor:See updated information on pararneters
【项目校准】
1.定期校准,参照厂商说明
2.更换试剂批号后,应校准。
3.维护保养之后如更换光源、清洗比色杯、清洁光路及仪器后光电校正、更换管路等应校准。
4.质控失控后,在进行其他相应处理后。质控结果仍不满意的,应重新校准。
5.特殊情况校准要求参见仪器操作维护手册。
【性能参数】
 
1.线性范围:0-250U/L(相关系数r≥0.99).
2.精密度:批内CV≤4%(n=20)、批间相对极差≤8%。
3.准确度:相对偏差(不准确度)≤10%。
【试剂的贮存
当保存于2-8,不开盖情况下至标签的失效期。
【试剂准备】
试剂是即开即用的。无需特殊准备。
操作程序(逐步地):
1.         AU640开机
2.         确认两瓶清洗剂有足够的量。
3.         打开蒸馏水供应系统的阀门。
4.         如果没有设定自动开机,请按分析仪器上的[POWER ON]键。
5. 在[Start Condition]屏幕,输入所需信息,并按F2退出。
1.       如果要求输入密码,请输入密码。
2.       确认仪器上的在线试剂的位置是否正确、数量(体积)是否充足,不足请添加并在系统状态中的试剂状态检查试剂。
3.       在急诊台Wash1的位置的试管中加满一支1N HCL的样品针清洗液。
开始分析
1.把定标、质控、和标本架放在架子传送带上。
2.用鼠标点击屏幕最上方的[START ANALYZER]图标。
3.点击F2退出键,退回到主屏幕。
【质量控制】
在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控作为未知标本进行分析,以2S为质控警告限,3S为失控限,绘制质控图,判断是否在控。质控规则参见生化室室内质控操作规程.SOP文件。
计算
无需手工计算
【参考范围】
本实验室:0-24U/L
临床意义增高:网状内皮系统肿瘤,肾病,急性白血病,伤寒,溶血性黄疸,肝实质病变。
Tags:操作,完整,测定,试剂,2.,1.,3.,uL,仪器,5.,
责任编辑:何辉

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