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ABO血型鉴定(生理盐水法)

时间:2009-10-07 03:06|来源:实验室前沿| 分享|点击:


1. 原理

根据红细胞上有或无A抗原或/和B抗原,将血型分为A型、B型、AB型及O型四种。A型红细胞膜上含有A抗原,B型红细胞膜上含有B抗原,AB型红细胞膜上含有A、B抗原,抗A、抗B试剂是分别针对A抗原和B抗原的特异性抗体。可利用红细胞凝集试验,通过正、反定型准确鉴定ABO血型。所谓正定型,是用已知的抗A、抗B试剂与受检者的红细胞混合时,与抗A试剂发生凝集者即为A型,与抗B分型试剂发生凝集者即为B型,与抗A、抗B试剂均发生凝集者即为AB型,与抗A、抗B试剂均不凝集者即为O型。所谓反定型,是用已知A细胞和B细胞来测定血清中有无相应的抗-A或/和抗-B。
2. 标本采集
2.1 标本种类:新抽取的抗凝血或手指末梢血和血清。
2.2 标本要求:
2.2.1 抗凝剂:如用抗凝血,多主张用EDTA K2(㎎/dL)抗凝。
2.2.2 用手指末梢血作血型检测时,最少样品量为100ul,如手指有
冻疮,则主张采耳垂血。
3. 标本储存:2小时内完成实验,室温放置下不超过8小时,4℃-8℃
保存不超过48小时。
4. 标本运输:室温运输
5. 标本拒收标准:细菌污染、溶血标本不能作测定
6. 试剂
6.1 试剂名称:ABO血型检测试剂
6.2 试剂生产厂家:南京华欣药业生物工程有限公司
6.3 试剂组成
试剂1:抗A分型试剂(蓝色),效价1:128,2℃-8℃避光保存,室温放置不宜过久。
试剂2:抗B分型试剂(黄色),效价1:128,2℃-8℃避光保存,室温放置不宜过久。
试剂3:5%A、B及O型红细胞盐水悬液,自制。配制方法:分别采取已知A、 B、O三种血型的红细胞,经盐水洗涤3次,以压积红细胞配成不同浓度的红细胞悬液。
红细胞悬液的配制

悬液浓度(%)
压积红细胞(滴)
盐水(滴)
2
5
10
20
1
1
1
1
2ml(40)
0.8ml(16)
0.4ml(8)
0.2ml(4)
内容来自实验室前沿网站

为了防止红细胞悬液敏感性不一致,可随机采取3个或以上的健康成人血液,按A、B、O型分别混合后,按上法制备。
7. 操作步骤
Tags:生理,鉴定,血型,细胞,试剂,血清,
责任编辑:何辉

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