1。仪器和设备
1.1霉菌培养箱:36±1℃
1.2恒温水浴箱:45±1℃
1.3高压灭菌锅
1.4均质器
1.5试管:18×150mm
1.6锥形瓶:500ml 250ml
1.7平皿:直径为90mm
1.8灭菌吸管
1.9灭菌均质杯
1.10酒精棉
1.11天平:感量0.1g
1.12冰箱:0-4℃和-15~-20℃
2.培养基的制备
2.1孟加拉红培养基
称取31.6g溶于1000.0ml蒸馏水中,加热煮沸至完全溶解,分装。121℃20min高压灭菌。
2.2生理盐水:
称氯化钠8.5g溶于1000.0ml蒸馏水中,分装锥形瓶和试管内,每管吸9ml,121℃高压灭菌。
3.操作程序
3.1样品稀释和培养
以无菌操作取25g样品
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放入装有225ml生理盐水的无菌均质杯内,
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均质1分30秒,制成1:10的样品匀液
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用灭菌吸管吸取1ml样液
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实验室前沿,了解实验室动态
放入9ml生理盐水中,摇匀。
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从试管中吸取1ml样液
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分别注入两个平皿内,
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实验室前沿,了解实验室动态
制成10倍的样品稀释液,
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依次类推(10-2、10-3)
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分别倒12-15ml孟加拉红入各平皿
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立即将平皿内的样液和琼脂充分混合
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将平皿旋转,注意倾注时间不宜太长
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待琼脂凝固后将平皿翻转
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立即放进25±1℃的霉菌培养箱内
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培养7天
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内容来自实验室前沿网站
4.报告结果:
取相同稀释度的两个平板数的平均值乘以稀释倍数。标准:≤100/g.