PCR法扩增启动子5端系列缺失突变体 采用PCR方法从基因组中扩增目的基因的全长启动子,在所扩增的片段两端分别引入限制性内切酶位点,以用于构建pGL3 basic报告基因表达质粒载体。同样采用PCR方法,以目的基因全长启动子报告基因表达质粒为模板分别扩增目的基...[阅读全文]
造血系统疾病的诊断除了依靠细胞形态的检查外,在很大程度上还得依靠组织学的检查。骨髓穿刺活检的病理诊断,是临床用药的指南。因此,骨髓石蜡切片的质量控制显得相当重要。下面分别从固定、脱钙、切片、烤片、染色等程序,谈谈我们的做法和体会。 一、 固...[阅读全文]
目前,小组织活检标本的有胃肠粘膜、肾脏 穿刺、肝脏穿刺,肺支气 管 镜、复垦刮宫和 鼻咽粘膜活检等。这些组织为了赶进度,只能跟大组织一起进入自动脱水机脱水程序。由于 组织 较小,他们经受了不该经受的待遇,过 度的脱水,过度的透明和过度的浸 蜡,往...[阅读全文]
免疫球蛋白样转录体(Iglike transcrlpts,ILTs)作为受体,含有杀伤细胞免疫球蛋白样功能区,其胞质区含4个ITIM。ILTs的成员ILT-2对HLAI类分子有较广的特异性,主要结合I类分子3结构域以及HLAI类分子的同源体UL18,一种巨细胞病毒编码的分子。这可能代表着病...[阅读全文]
【试剂与设备】 (1)待检细胞:PBMC,脾细胞,淋巴结细胞或经过相应病毒感染细胞(注意其HLA-A型别)刺激形成的CTL细胞 (2)FACS缓冲液(FB):PBS+2%小牛血清+0.1%叠氮钠 (3)2 X HLA-I/抗原肽四聚体:2倍使用浓度的HLA-I/抗原肽四聚体 (4)1%多聚甲醛(...[阅读全文]
电镜组织化学技术是在光镜组织化学基础上发展起来的形态学研究技术,它将组织化学与电镜技术相结合,使组织化学研究从光镜微细结构水平发展到电镜超微结构水平。电镜组织化学技术将组织细胞中特定的化学成分通过特定的化学反应形成反应产物,然后使其形成电...[阅读全文]
免疫纳米金染色与免疫胶体金银法染色基本相似,也可分为包埋前染色和包埋后染色。下面分别介绍包埋前免疫纳米金单重染色和与免疫酶染色结合的双重染色基本程序: 包埋前免疫纳米金单重染色按以下步骤进行免疫染色: 1)含1%正常血清或l%BSA的PBS预孵育20~3...[阅读全文]
该法可用于分离提取人、兔、小鼠血清中的Ig及杂交瘤诱生的腹水和培养上清液中McAb。 【材料和试剂】 (1)正辛酸。 (2)60mmol/L,pH4.0醋酸缓冲液,PBS。 (3)透析袋。 (4)高速低温离心机。 【操作步骤】 (1)将待提取样品用60mmol/L,pH4.0醋酸缓冲液...[阅读全文]
抗体是机体在抗原刺激下所产生的特异性球蛋白,所以又称为免疫球蛋白(Ig)。特异性抗体是免疫应答中的重要产物,因此亦是免疫学实验中常用的试剂,对于抗原的分析鉴定和定量检测极为重要,在各种免疫学诊断和治疗中应用极为广泛。 传统的方法制备的抗体是用...[阅读全文]
在免疫学研究中,常选用以下的几种实验动物: (一) 大鼠 :大鼠对绵羊红细胞和牛r球蛋白的免疫反应有品系差异。大鼠有抗体IgE,蠕虫感染常能诱发大量的IgE抗体,它们存在于血液循环中,常规的免疫法只能使大鼠产生少量的抗体,在体内存在的时间较短。百日...[阅读全文]
免疫电镜技术与光镜免疫细胞化学染色方法的基本原理和试剂准备基本相同,相关内容可参...
配1000ML的0.1 %盐酸乙醇液:蒸馏水 290ml 与无水 乙醇 700 ml 混合后加入浓盐酸 10m...
1.组织处理 恰当的组织处理是做好免疫组化染色的先决条件,也是决定染色成败的内部因...
Kausche等(1939)烟草花叶病毒吸附到金颗粒上,在电镜下观察金离子呈高电子密度。然而...
辛酸提取法该法可用于分离提取人、兔、小鼠血清中的Ig及杂交瘤诱生的腹水和培养上清液...
常规固定液的配制 (1) 10%甲醛液(常规标本用此固定液固定标本) 浓甲醛 10ml 蒸馏...