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  • [免疫室] PPO荧光的成像技术

    1.电泳或染色后,将凝胶置于脱色剂(7%冰乙酸,25%甲醇)中振摇脱色30rain。仔细倒去脱色剂,然后在DMSO废液中清洗,空干,再加入5倍胶体积的DMSO废液。 2.室温下振摇温育45rain,弃去DMSO废液,加入5倍于凝胶体积的新鲜DMSO。 3.室温下振摇温育45min,然...[阅读全文]

  • [病理室] 免疫组化用微波炉处理切片的原理

    微波炉法的原理是通过持续加热以破坏某些阻碍抗体进入的亚细胞结构。 1.所需试剂,特殊设备 1.0mmol/LEDTA(pH 8.0);PBS。 微波炉。 2.操作步骤 (1)将标本片或样品放入支架或其他适宜的容器中。石蜡包埋样品的切片应脱蜡和再水化(见石蜡组织切片步骤7和8...[阅读全文]

  • [病理室] 冷冻组织切片操作步骤

    1.主要内容 如果定位检测范围为每个细胞约1000~10000个抗原分子。 检测抗原存在及定位; 定性及半定量; 敏感度依赖于抗原的最低水平及存在部位; 如果抗原局部浓度较高,则使用亲和力较低的抗体。 2.操作步骤 (1)将未受损伤的组织切剖成小样本,约lcmXIc...[阅读全文]

  • [免疫室] 氯化铯离心法纯化噬菌体

    [器材和试剂] 1.L8M Beckman超速离心机或与其相当的机型 2. 吊桶式SWTi4l转头或相当类型 3. 氯化铯(Sigma) 4. PBS 5. 纯化的噬菌体样本 [方法] 1.在每毫升最后的噬菌体悬液(例如来自实验方案13.11)中,加入0.45 g氯化铯,充分混匀至溶解。 2.用吊桶式转...[阅读全文]

  • [免疫室] 微量滴定板中表达噬菌体抗体步骤及方法

    [器材和试剂] 1.用于细菌培养的无菌96孔圆底微量滴定板,如Nune 62162(可自VWR购得) 2. 2TY/amp/glu培养基 3. 含30%甘油的2TY/amp/glu培养基(2TY/amp/glu/gly) 4. 2TY/amp/kan培养基 5. 选自铺板培养或抗体文库选择的克隆株 [方法] 1.用无菌牙签挑取单个克...[阅读全文]

  • [免疫室] 胶体金pH值的调整方法

    胶体金与蛋白质的结合成功与否,取决于pH值,一般只有在蛋白质等电点(p I )略偏碱的条件下,二者才能牢固地结合,因此,标记之前须将胶体金溶液的pH值调至标记蛋白质的等电点略偏碱。一般可用0.1mol/LK 2 CO 3 或0.1mol/L HCl调高或调低pH值。由于金溶胶会...[阅读全文]

  • [临检室] 粪便隐血检验标准操作

    目的:保证粪便隐血检验结果的准确、可靠。 适用范围:粪便隐血检验,标本类型为粪便。 试剂来源: **生物技术有限公司。 标准操作: 4.1:打开检查片正面的盖子,并利用取样棒挖取不同位置的粪便检体涂抹在A窗及B窗的(切勿超出方格之外),然后合上盖子。...[阅读全文]

  • [临检室] 精液检验标准操作

    目的: 保证 精液检验 结果的准确、可靠。 适用范围: 精液检验 , 标本类型为 精液 。 试剂来源: 自配 标准操作: 1. 取 1 滴液化混匀精液滴于载玻片上,加盖玻片。先在低倍镜下了解总体精子活力,然后在高倍镜下观察精子的活动率及活动力。 2.精子活动率...[阅读全文]

  • [免疫室] 抗原结合性抗体识别鉴定

    当用纯化抗原进行选择时,评价所选择抗体的最佳方法是在高通量滴定模式下进行酶联免疫吸附试验(ELISA)。虽然这也许与抗体最终使用无关,但它提供了一个起始的筛选实验方案,能够让续后的分析集中在有希望的抗体上。大多数噬菌粒展示载体的设计容许进行两种EL...[阅读全文]

  • [病理室] 碘化丙啶原理及染色方法

    1.原理 碘化丙啶(propidium iodide,PI)不能穿人完整的活细胞膜中,即正常细胞和凋亡细胞在不固定的情况下对PI拒染,而坏死细胞由于失去膜的完整性,PI可进入细胞内与DNA结合,根据此特点,使用PI染色可鉴别死细胞。如果对活细胞染色必须在染色前进行固定,...[阅读全文]

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