限制性酶及PCR的方法 此法将MSRE和PCR技术的结合,大大提高了检测DNA甲基化的灵敏度。该法基于DNA经MSRE切割后,位于限制性位点侧翼的特异性引物仅能有效扩增那些甲基化而免于切割的DNA片段,但不能扩增未甲基化且遭受切割的DNA片段。本法定性只需0.6ngDNA...[阅读全文]
1.免疫荧光单标记方法 免疫荧光单标记是指只标记一种蛋白质分子,方法比较简单,只要按照染色步骤去做,通常不存在太多的问题。但要注意固定液的选择,固定液选择的合适与否,可能会直接影响染色结果。具体染色方法如下。 1)所需材料与试剂 (1)培养在盖玻片...[阅读全文]
流式细胞仪最大的贡献在于促进了免疫学基础研究和临床诊断。目前流式细胞术已被广泛用于细胞生物学、免疫学、肿瘤学、血液学、病理学、遗传学和临床检验等多学科领域的基础和临床研究。 1 .流式细胞仪的功能 (1)细胞参量分析 包括细胞大...[阅读全文]
目前尚无公认的标准化的测定方法,常用的有: (1)蛋白质印迹法:经SDS-PAGE分离牛或人CNS髓磷脂,将蛋白质转印至硝酸纤维素膜,而后与稀释的检测血清孵育,洗涤后加入辣根过氧化物酶标记的羊抗人IgM,经二氨联苯胺染色;或者依次加入一抗(兔抗人IgM),二抗(...[阅读全文]
AChR抗体是否结合到了肌细胞AChR上,可用125I--BuTx标记肌细胞抽提物以免疫沉淀法来检测,此方法同样可以用来检测患者血清中的抗AChR抗体。血清15/ll加入标记的抽提物中室温下2h或4~C过夜,5000rpm离心3分钟取沉淀,经离心洗涤23次,然后用丁计数仪计数。用...[阅读全文]
1.低渗处理法 【试剂及配制】 (1)蒸馏水 (2)1.8%氯化钠溶液 【操作方法】 (1) 上述各种方法所得白细胞悬液中加入1ml蒸馏水,轻轻地震荡20s,使混杂的红细胞裂解; (2) 加等量1.8%氯化钠溶液,调至等渗; (3) 再加Hanks溶液混匀,离心沉淀,反复两...[阅读全文]
(一) 真菌的菌落观察 观察真菌菌落的形态特点及颜色有助于病原性真菌的鉴定。一般观察真菌的菌落必需将真菌培养于沙保弱氏培养基(俗称大培养),经数日致十数日的培养后才可看到典型菌落。 解放军总医院第一附属医院皮肤科马天 1. 材料 (1)临床标本(可...[阅读全文]
具有凋亡特征的细胞程序性死亡后,可在扫描或透射电镜下观察到凋亡小体,该小体系由细胞膜卷曲、脱落形成的小泡,其内包含有完整的细胞器及核片段。这种小体易被巨噬细胞、上皮细胞等吞噬,借以清除正常发育过程中死亡的细胞。细胞坏死则无此小体形成。但是...[阅读全文]
标本类型 : 静脉血 标本收集 : 空腹静脉血,使用肝素钠抗凝的绿头管采集新鲜全血5ml,每周一至五8:00-11:00 拒收原因: 标本已凝集、标本抗凝比例不当、抗凝剂不当(抽错管)、标本标记不清。 检测方法 : 在一定温度(37℃)控制血粘度仪的切液锥按设定的切...[阅读全文]
标本类型:0.109M(3.2%)枸橼酸钠抗凝静脉血(1:9) 血细胞比容(Hct)小于29%或大于50%时,抗凝剂与血液的比例应按下式调整:抗凝剂量(ml)= (100 Hct)血液(ml) 0.00185 标本收集:使用装有0.109M(3.2%)枸橼酸钠抗凝剂的蓝头管采集静脉血1.8ml或2....[阅读全文]
免疫电镜技术与光镜免疫细胞化学染色方法的基本原理和试剂准备基本相同,相关内容可参...
配1000ML的0.1 %盐酸乙醇液:蒸馏水 290ml 与无水 乙醇 700 ml 混合后加入浓盐酸 10m...
1.组织处理 恰当的组织处理是做好免疫组化染色的先决条件,也是决定染色成败的内部因...
Kausche等(1939)烟草花叶病毒吸附到金颗粒上,在电镜下观察金离子呈高电子密度。然而...
辛酸提取法该法可用于分离提取人、兔、小鼠血清中的Ig及杂交瘤诱生的腹水和培养上清液...
常规固定液的配制 (1) 10%甲醛液(常规标本用此固定液固定标本) 浓甲醛 10ml 蒸馏...