立克次体(Rickettsia)是一类专性活细胞内寄生的原核细胞微生物,具有细胞壁,含有RNA和DNA,以二分裂繁殖。需在细胞内繁殖,不能在无细胞的人工培养基中生长。它是属于人兽共患的自然疫源性疾...[阅读全文]
器材与试剂的准备 洗涤缓冲液 结合缓冲液 辣根过氧化物酶(HRP)连接的抗M13单克隆抗体(mAb) (Amersham Biosciences) HRP底物㈠OPD(邻苯二胺,o-phe-nylenediamine) (Sigma)或ATBS 【2,2-连氮基-双-(3-乙基苯并噻吡咯啉-6-磺 酸),2,2-azinobis(3-ethylbenzo...[阅读全文]
结合筛选,或后随着扩增的结合筛的循环,应继续进行直到得到了合适的变异体,或者直到已经能推断出得不到这样的克...[阅读全文]
提供了一种相对快速的、定性的比较不同底物相对酶解效率的替代方法。这种方法需要将底物序列展示于一个融合蛋白之中,此融合蛋白与筛选过程中使用的是同样的融合蛋白。之后,从融合蛋白中酶切下来的产物还可以通过N端测序分析得到易断裂键的序列。以碱性磷酸...[阅读全文]
器材和试剂 ● 多孔板 (Immuno plate Maxisorp, Nuric) ● 包被缓冲液 (50mmol/L NaHC0 3 , pH 9.6,0.05%硫柳汞) ● 单克隆抗体(mAb)57D1。该抗体 能识别M13噬菌体次要衣壳蛋白(pⅢ)的N末端。它是用M13噬菌体 颗粒免疫大鼠而获得的。来自含57D1 杂交瘤...[阅读全文]
[器材和试剂] ● 噬菌体缓冲液 ● XLl-Blue TB细胞 ● LB-琼脂培养基+Amp/G1u平板 ● LB+Amp; ● M13K07辅助噬菌体(Amersham Biosciences) 、 ● IPTG [方法] 1.用巴氏吸管从单个噬菌斑中挑取噬菌体,并转移到装有200ul噬菌体缓冲液的微量管中。 2.70℃加...[阅读全文]
抗高尔基体抗体检测方法 (1)间接免疫荧光法:GAA具有特殊的荧光模式:细胞质的核周围两端甚至一端,出现大小不均的颗粒型着染,如帽形,细胞分裂期阴性。常用抗原载体为Hep2细胞,而鼠肝、,肾或胃冷冻切片易漏检。小脑冷冻切片中的浦肯野细胞(Yo)是高尔基体...[阅读全文]
检测方法 以乙醇固定的白细胞采用间接免疫荧光法(11F)检测ANCA时,标本中淋巴细胞的存在十分重要,能帮助区分抗核抗体与ANCA(ANCA在淋巴细胞中不着染)。当ANA和抗MPO同时存在时,用多聚甲醛固定的中性粒细胞也可区分ANA和抗MPO抗体。此时ANA仍为核着染,而MP...[阅读全文]
为了得到更明确的染色结果,在用IGS方法定位细胞抗原时可采用搭桥法,使IGS得到放大,这里介绍一种用抗A蛋白抗体作桥的PAG放大法。由于抗蛋白A抗体既能通过Fab段又能通过Fc段与PAG上的蛋白A结合,因此与其他桥抗体相比,它能够在抗原位点处聚集更多的胶体金...[阅读全文]
对哺乳类组织的免疫染色研究常采用冷冻切片。就保持组织结构和抗原而言,冷冻切片是制备标本最好的方法。它的主要缺点是标本必需冷冻保存,并需要特殊的切片机如恒冷箱切片机。而许多临床标本用这种方法的效果不好,对组织结构和病理学分析主要采用福尔马林...[阅读全文]
免疫电镜技术与光镜免疫细胞化学染色方法的基本原理和试剂准备基本相同,相关内容可参...
配1000ML的0.1 %盐酸乙醇液:蒸馏水 290ml 与无水 乙醇 700 ml 混合后加入浓盐酸 10m...
1.组织处理 恰当的组织处理是做好免疫组化染色的先决条件,也是决定染色成败的内部因...
Kausche等(1939)烟草花叶病毒吸附到金颗粒上,在电镜下观察金离子呈高电子密度。然而...
辛酸提取法该法可用于分离提取人、兔、小鼠血清中的Ig及杂交瘤诱生的腹水和培养上清液...
常规固定液的配制 (1) 10%甲醛液(常规标本用此固定液固定标本) 浓甲醛 10ml 蒸馏...