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  • [免疫室] ELISA法检测立克次体方法

    立克次体(Rickettsia)是一类专性活细胞内寄生的原核细胞微生物,具有细胞壁,含有RNA和DNA,以二分裂繁殖。需在细胞内繁殖,不能在无细胞的人工培养基中生长。它是属于人兽共患的自然疫源性疾...[阅读全文]

  • [免疫室] 利用ELISA定量测定结合的噬菌体

    器材与试剂的准备 洗涤缓冲液 结合缓冲液 辣根过氧化物酶(HRP)连接的抗M13单克隆抗体(mAb) (Amersham Biosciences) HRP底物㈠OPD(邻苯二胺,o-phe-nylenediamine) (Sigma)或ATBS 【2,2-连氮基-双-(3-乙基苯并噻吡咯啉-6-磺 酸),2,2-azinobis(3-ethylbenzo...[阅读全文]

  • [免疫室] 噬菌体克隆鉴定方法

    结合筛选,或后随着扩增的结合筛的循环,应继续进行直到得到了合适的变异体,或者直到已经能推断出得不到这样的克...[阅读全文]

  • [免疫室] AP融合蛋白的构建方法

    提供了一种相对快速的、定性的比较不同底物相对酶解效率的替代方法。这种方法需要将底物序列展示于一个融合蛋白之中,此融合蛋白与筛选过程中使用的是同样的融合蛋白。之后,从融合蛋白中酶切下来的产物还可以通过N端测序分析得到易断裂键的序列。以碱性磷酸...[阅读全文]

  • [免疫室] 利用噬菌体上清和人血清进行ELISA

    器材和试剂 ● 多孔板 (Immuno plate Maxisorp, Nuric) ● 包被缓冲液 (50mmol/L NaHC0 3 , pH 9.6,0.05%硫柳汞) ● 单克隆抗体(mAb)57D1。该抗体 能识别M13噬菌体次要衣壳蛋白(pⅢ)的N末端。它是用M13噬菌体 颗粒免疫大鼠而获得的。来自含57D1 杂交瘤...[阅读全文]

  • [免疫室] 小规模制备噬菌体上清

    [器材和试剂] ● 噬菌体缓冲液 ● XLl-Blue TB细胞 ● LB-琼脂培养基+Amp/G1u平板 ● LB+Amp; ● M13K07辅助噬菌体(Amersham Biosciences) 、 ● IPTG [方法] 1.用巴氏吸管从单个噬菌斑中挑取噬菌体,并转移到装有200ul噬菌体缓冲液的微量管中。 2.70℃加...[阅读全文]

  • [免疫室] 抗高尔基体抗体的检测技术及临床意义

    抗高尔基体抗体检测方法 (1)间接免疫荧光法:GAA具有特殊的荧光模式:细胞质的核周围两端甚至一端,出现大小不均的颗粒型着染,如帽形,细胞分裂期阴性。常用抗原载体为Hep2细胞,而鼠肝、,肾或胃冷冻切片易漏检。小脑冷冻切片中的浦肯野细胞(Yo)是高尔基体...[阅读全文]

  • [免疫室] MPO-ANCA的检测技术及临床意义

    检测方法 以乙醇固定的白细胞采用间接免疫荧光法(11F)检测ANCA时,标本中淋巴细胞的存在十分重要,能帮助区分抗核抗体与ANCA(ANCA在淋巴细胞中不着染)。当ANA和抗MPO同时存在时,用多聚甲醛固定的中性粒细胞也可区分ANA和抗MPO抗体。此时ANA仍为核着染,而MP...[阅读全文]

  • [免疫室] 蛋白A—金(PAG)放大方法

    为了得到更明确的染色结果,在用IGS方法定位细胞抗原时可采用搭桥法,使IGS得到放大,这里介绍一种用抗A蛋白抗体作桥的PAG放大法。由于抗蛋白A抗体既能通过Fab段又能通过Fc段与PAG上的蛋白A结合,因此与其他桥抗体相比,它能够在抗原位点处聚集更多的胶体金...[阅读全文]

  • [病理室] 冷冻组织切片的制备

    对哺乳类组织的免疫染色研究常采用冷冻切片。就保持组织结构和抗原而言,冷冻切片是制备标本最好的方法。它的主要缺点是标本必需冷冻保存,并需要特殊的切片机如恒冷箱切片机。而许多临床标本用这种方法的效果不好,对组织结构和病理学分析主要采用福尔马林...[阅读全文]

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