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生化分析仪基本参数原理及应用

时间:2010-06-17 02:48|来源:实验室前沿| 分享|点击:


了解生化分析仪基本参数的原理,有利于仪器、试剂的正确使用,有助于正确分析和处理测定数据。但是,配套系统的原装分析参数不宜更改;采用非仪器配套的试剂及校准品体系时,参数修改要慎重,对于不同仪器、不同类型的反应分析程序,所显示的人机对话分析参数信息有所不同。

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    一、反应监测时间 内容来自实验室前沿网站

    对于终点法来说,读取反应达到平衡时的吸光度计算样品中待测物的浓度。对于连续监测法来说,要注意观察反应进程曲线,从而确定反应的预孵育期,延迟时间、连续监测的时段。对于一级或伪一级反应来说,连续监测的时间是一级反应的动态期的吸光度;对于基于零级反应的酶催化活性浓度速率法测定,连续监测的是零级线性反应期的吸光度。对于连续监测法来说,动态反应期的时间越长,越适用于临床应用,对于以酶为工具的代谢物酶促动力测定法,要增加动态反应期,即延长反应达到平衡的时间,可在反应体系中加入竞争性抑制剂,这样还可以提高测定的线性范围,对于酶催化活性浓度连续监测法来说,一定要注意线性反应时间,有的酶,例如,以硫代丁酰胆碱为底物的血清假性胆碱酯酶速率测定法,线性反应时间只有90秒。对于连续监测法来说,在监测期至少应读4个点(3个△A)。 实验室前沿,了解实验室动态

    多数全自动生化分析仪可以在整个测定反应周期连续监测(如HITACHI7170常规测定周期10分钟、监测34点,OLYMPUSAU600固定周期8分15秒、监测27点),但反应监测时间是指该时间内的测定读数要用于结果计算。它的设置与加样点、加试剂点(包括R1、R2……)、监测时间(读数点)、读数间隔时间及试剂样品比例等有关,要结合方法学,兼顾权衡。

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    1.反应时间(ReactionTime)指仪器的一个分析周期中,试剂和样品混合最末一点测定读数时间。它对终点法尤其重要,是终点法的瓶颈。有的仪器多个反应时间可选L如Hl—TACHI7170),须预先选定。多数仪器10分钟左右,这对试剂提出了较高要求。不少终点法试剂(尤其手工法试剂)反应时间常常也在lO分钟上下,测定时间没有余地,当样品浓度高或试剂质量下降时,均可致测定结果偏低。因此,终点法不宜采用标明反应时间接近和长于仪器最大反应时间的试剂盒。否则,必须用接近测定范围上限的高浓度质控血清监测。

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    2.监测时间(读数点)和读数间隔时间各类型仪器不尽一致。离心式生化仪读数间隔时间短,监测时间也短。流动式生化仪读数间隔时间一般较长。分立式生化仪一般监测时间10分钟左右,间隔10-30秒读数一次。有的仪器在整个测定反应周期全程读数,有的只读取指定时间(点)的吸光度。

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    3.加试剂点采用双试剂时,加R2点决定R1与样品的反应时间,也决定R2与R1及样品的反应时间。一般仪器各5分钟左右。HITACHI7170有4个加试剂点,若采用双试剂,各5分钟,则加R2设在第3加试剂点。 本文来自实验室前沿

    4.反应监测时间还要考虑延迟时间的长短、测定物质的浓度范围及相关临床价值和工作效率等因素。

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    二、延迟时间 内容来自实验室前沿网站

    延迟时间(DelayTime)指试剂与样品混合后到监测开始之间的时间。一般用于两点法和速率法,某些情况下也用于终点法。终点法应选择反应趋于平衡的时间(稳定期或平衡期)作测定,测定点前即所谓的孵育期。速率法的线性反应期之前即延迟期。正确选择延迟时间的长短,有利于准确测定,减少试验误差。设置一般根据试剂盒的说明书,还应考虑本室的仪器特点和工作程序。 实验室前沿,了解实验室动态

1.仪器特点比如,半自动生化仪多为流动比色池,要考虑泵速、进样管长短、反应液黏稠度及混合情况,以及室温、反应液温度同反应要求温度间的温差等。全自动生化仪的测定读数设置方式不同,直接以“秒”设置,或以测定点设置、测定点间隔时间不一样,需要灵活掌握。

Tags:分析仪原理,维修前必读
责任编辑:丁军

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