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设置生化分析仪的参数

时间:2010-06-17 03:25|来源:实验室前沿| 分享|点击:


1.分析方法
  常见的分析方法有:终点分析法、连续监测法、比浊测定法。
1.1 终点分析法
1.1.1 一点终点法  
  该法的特点是使用一种或两种试剂,待测定物与试剂反应达到终点时,测定吸光度,计算待测物的浓度。该法常见的有总蛋白双缩脲法、白蛋白溴甲酚绿法、葡萄糖氧化酶法。
1.1.2 两点终点法  
  也称固定时间法。在单试剂分析中,该法可以消除样品以及试剂的颜色、浊度的干扰,其原理是在样品与试剂混合后的延滞期后读取一个点A1,一定时间后读取A2,ΔA=A2-A1,然后比较标准和测定的ΔA值,求得待测物的浓度。单试剂分析常见的有肌酐苦味酸法。在双试剂分析中,该法还具有消除内源性物质测定的干扰,其原理是加入试剂1后读取A1,加入试剂2后读取A2,A1相当于读出样品空白值,A2才是实际呈色反应,因此ΔA=A2-A1。
1.2 连续监测法  
  其原理是在酶促反应的最适条件下,用物理、化学或酶促反应的分析方法,在反应速度恒定期(零级反应期)来连续观察和记录一定反应时间内底物或产物量的变化,以单位时间酶反应初速度计算出酶活力的大小和代谢物的浓度。其具体方法有两点速率法和多点速率法。

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1.2.1 两点速率法  
  观察在零级反应期内两个时间点的吸光度,用两个点的吸光度的差值(ΔA)除以时间(分),计算出每分钟的吸光度变化值。
1.2.2 多点速率法  
  在酶促反应进程的零级反应期内每隔一定时间(2-30s)进行一次监测,连续监测多次,求出单位时间内的反应速度。
1.3 比浊测定法  
  自动化生化分析仪一般只能做透射比浊分析,其原理是在光源的光路方向测量透过光强度,它常用于终点法测定,目前应用较多的为免疫透射比浊法。目前主要用于血清特种蛋白的检测,如载脂蛋白、微量蛋白、急性时相反应蛋白、免疫球蛋白以及某些药物监测等。
2. 温度
  一般生化分析仪的恒温控制器可以对25℃、30℃、37℃三种温度进行恒温,根据需要可以任意选择。由于酶在达到最适温度以前,温度每升高10℃,反应速率增加1-2倍,因此IFCC推荐酶测定时的温度设置为37℃。
Tags:如何设置分析仪,生化分析仪,教你设置
责任编辑:丁军

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