表面样品包括：筐、工作台、菜板、刀具、围裙、套袖、手、手套、白盒、工作服。 sysqy.com
每天做3类相同的表面样品做细菌总数、大肠菌群检测。手和手套还要增加金黄色葡萄球菌的检测。
1． 取样
工器具、内包装物料的取样：
在10 cm2 的面积上（内包装物料取10 cm2）用消毒棉签蘸取少许无菌生理盐水擦拭，然后放入10ml无菌生理盐水中（将棉签手拿的一端掐掉），充分振摇，制成1：10的稀释液
2．检验过程
⑴ 细菌总数：方法同第一章，结果报告“个/cm2”或“个/手”或“个/100cm 2”。
⑵ 大肠菌群：去氧胆酸盐类平板计数法
a、去氧胆酸盐琼脂培养基的制备：
称取40g于1000.0ml蒸馏水中,加热煮沸至完全溶解,冷至50℃,倾注平板备用。
b、接种与培养
选择适宜的两个连续稀释度的样品液，用无菌吸管吸取1ml注入无菌平皿中，每个稀释度做两个平皿，倒入冷至45℃左右的培养基约15ml，摇匀凝固后再在上层倒入3-5ml培养基，旋转平皿，覆盖于表面，36±1℃的培养48±2h。
平板上的大肠菌群呈深红色，菌落直径大于0.5mm，周围可能有雾状胆盐沉淀，菌落形态有的边缘整齐，呈圆形，扁平，有的边缘不齐，表面凸起或呈波状，且为玫瑰红色。参照第一章，选择10-100的菌落计算结果，报告为“个/cm2”或“个/手”或“个/100cm 2”。
⑶ 金黄色葡萄球菌：平板表面计数法
a、从1：10稀释液中吸取1ml ,接种到3个表面干燥的B-P平板上，这3个平板上分别接种0.4ml、0.3ml、0.3ml。
b、以涂抹棒接种物涂布于琼脂表面，避免涂到平板边缘，将平板正置到接种物被培养基吸收，将平板翻转于36±1℃的培养箱内培养48±2h。（金黄色葡萄球菌在B-P平板上的典型菌落特征：呈圆形，表面光滑，凸起、湿润，直径2～3mm，灰色至黑色，有光泽，常有浅色边缘，周围绕以不透明圈沉淀，其外常有一清晰带。）
c、从可计数的各类型菌落中至少各选取1个菌落，接种至肉汤培养基中，于36±1℃的培养箱内培养20～24h。
d、吸取肉汤培养物0.3ml同0.5ml凝固酶试验兔血浆混合，36±1℃培养，6h内观察混合液是否凝固，将试管倒置或倾斜，培养物不流动为阳性。
e、 将呈凝固酶阳性的菌落所代表的3个平板上的菌落相加，并乘以样品稀释倍数，结果报告同上。
⑷ 空气落菌数的测定（沉降法）
在车间的四角及中心5个点，各放置1个直径9cm的倾入灭菌计数琼脂的平板，在采样点打开盖暴露5分钟，36±1℃培养48h。取5个平板计数结果的平均值，报告为“个/平皿”。 sysqy.com
