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奈瑟菌属和布兰汉菌属及其检验

时间:2009-07-20 03:48|来源:互联网| 分享|点击:


1、分类

   “伯杰鉴定细菌学手册”第9版将奈瑟菌属(Neisseria)和布兰汉菌属(Branhamella)归于群4,将奈瑟菌属、卡他布兰汉菌属、莫拉菌属、金氏菌属和不动杆菌属归于奈瑟菌科。奈瑟菌属中的淋病奈瑟菌(N.gonorrhoeae)、脑膜炎奈瑟菌(N.meningitidis)以及布兰汉菌属中的卡他布兰汉菌(B.catarrhalis)是主要的致病菌。 sysqy.com

    2、细菌特性 内容来自实验室前沿网站

    ⑴淋病奈瑟菌
    ①形态染色  形态似脑膜炎奈瑟菌,成双排列,两菌接触面平坦,呈肾形或咖啡豆的革兰阴性球菌。脓液标本中,大多数淋病奈瑟菌位于中性粒细胞内,但慢性淋病病人多分布于细胞外。无芽胞,无鞭毛,新分离株有荚膜和菌毛。
    ②分离培养  本菌对营养的要求比脑膜炎奈瑟菌更高,只能在巧克力平板和专用选择培养基中生长,初次分离须供给5%CO2。最适温度为35~37℃。经24~48h后,形成圆形、凸起、灰白色、直径0.5~1.0 mm的光滑型菌落。根据菌落大小、色泽等分T1~T5五种类型,菌落有自溶性。
    ③生化反应  本菌只分解葡萄糖,产酸不产气,不分解乳糖、蔗糖等。氧化酶和触酶试验阳性。
    ④抗原构造  至少有三类,①菌毛蛋白抗原;②脂多糖抗原;③外膜蛋白抗原。根据外膜蛋白抗原的不同,将淋病奈瑟菌分成A、B、C等16个血清型。
    ⑤抵抗力  对外界抵抗力低。干燥状态下1h或55℃5min、100℃立即死亡。在患者分泌物污染的衣裤、被褥、毛巾及厕所坐垫上,能存活18~24h。对各种消毒剂极敏感。

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    ⑵脑膜炎奈瑟菌
    ①形态染色  呈肾形或豆形,成双排列的革兰阴性球菌,人工培养后呈卵圆形或球形,排列不规则,单个、成双或四个相联等。在患者脑脊液中位于中性粒细胞内。新分离株多有荚膜和菌毛。
    ②培养特性  营养要求高,需在含有血液、血清等培养基中才能生长。常用培养基为巧克力(色)琼脂平板、血平板和卵黄双抗平板。最适生长温度37℃ ,专性需氧,5%CO2可促进生长。巧克力平板上的菌落为圆形、扁平、光滑、半透明;在血平板上不溶血;卵黄双抗培养基上菌落较大,光滑、湿润、扁平。
    ③生化反应  能分解葡萄糖和麦芽糖,产酸不产气。
    ④ 抗原构造  主要有荚膜多糖群特异性抗原、外膜蛋白型特异性抗原、脂多糖抗原和核蛋白抗原四种。根据荚膜多糖抗原的不同,可将脑膜炎奈瑟菌分为13个血清群,我国流行的菌株以A群为主。
    ⑤抵抗力  本菌抵抗力弱,对磺胺类、青霉素、链霉素均敏感。

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    3、临床意义

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    ⑴淋病奈瑟菌
    致病物质有外膜蛋白、菌毛、IgAI、蛋白水解酶、内毒素等。成人淋病主要通过****传染,污染的毛巾、衣裤、被褥等也起一定传播作用,男性可发展为前列腺炎、附睾炎等;女性可致前庭大腺炎、盆腔炎或不育。母体患淋菌性阴道炎或子宫颈炎时,婴儿出生时可致淋菌性结膜炎。病后免疫力弱且不持久,再感染和慢性患者较多见。
    ⑵脑膜炎奈瑟菌
    主要引起流脑。致病物质为荚膜、菌毛和内毒素。5岁以下儿童多见,6个月~2岁的婴儿发病率最高。感染早期有上呼吸道症状,少数引起败血症,进而致化脓性脑脊髓膜炎。
    ⑶他布兰汉菌
    可引起中耳炎、鼻窦炎、慢性阻塞性肺炎。 内容来自实验室前沿网站

    4、微生物学检验

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    ⑴炎奈瑟菌 本文来自实验室前沿

    ① 检验程序  见文章末尾图9-5。 copyright sysqy.com

    ② 标本采集  菌血症期病人取血液,有出血点或瘀斑者取瘀斑渗出液,出现脑膜刺激征时取脑脊液。上呼吸道感染和带菌者,可取鼻咽分泌物等。标本采集后应立即送检,或用预温平板进行床边接种后立即置37℃ 培养。
    ③检验方法
    显镜检查  ①脑脊液,离心取沉淀物涂片,革兰染色或美蓝染色后镜检,如在中性粒细胞内、外有革兰阴性双球菌,可作出初步诊断;②瘀血点,经碘酊、乙醇消毒后,用无菌针头挑破瘀点,挤出少量血液或渗出液,制成印片,自然干燥后革兰染色和美蓝染色,阳性率达80%左右。
      分离培养  血液或脑脊液先增菌后,再接种巧克力平板,5%CO2、37℃18~24h后可形成圆形、凸起、光滑、湿润、灰褐色菌落。挑取可疑菌落涂片染色检查,并进一步作生化试验等鉴定。

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    ⑵淋病奈瑟菌

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    ①检验程序  参照脑膜炎奈瑟菌的检验程序。
    ②标本采集  男性患者用无菌棉拭取尿道脓性分泌物,女性患者取宫颈分泌物,患结膜炎的新生儿取结膜分泌物。因本菌抵抗力极低且易自溶,故采集标本后应立即送至检验室。
    ③检验方法
    显微镜检查  脓性分泌物涂片,革兰染色镜检。如发现中性粒细胞内革兰阴性双球菌可初步诊断。
    分离培养  是目前世界卫生组织推荐的筛选淋病病人惟一可靠的方法。标本接种在预温的巧克力平板或选择性培养基,该培养基含万古霉素、多粘菌素、制霉菌素等多种抗菌药物,可抑制杂菌生长,利于淋病奈瑟菌的检出。37℃、5%~10%CO2、24h~48h后,取可疑菌落进行涂片镜检,并作氧化酶、糖发酵或协同凝集等鉴定。 本文来自实验室前沿

    鉴定
    推测性鉴定  革兰染色见阴性双球菌和氧化酶试验阳性是两个推测性鉴定指标。
    确证性鉴定  利用生化反应鉴定奈瑟菌属和卡他布兰汉菌。
    核酸检测技术:检测淋病奈瑟菌,可快速诊断。
    淋病治疗首选青霉素。近年来,对青霉素和四环素耐药,对壮观霉素和三代头孢菌素、喹诺酮类敏感的淋病奈瑟菌 (PRNG)临床上多见。
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