传统诊断方法是根据病猪主要病变在蹄部发生水疱和烂斑，哺乳仔猪死亡率高，牛羊也同时可感染发病等即可作出初步诊断。确诊的方法很多，常用的有动物接种试验、中和试验、琼脂扩散试验及相关抗原琼扩试验和反向间接血凝试验等。
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FMD的快速检测是有效控制和消灭该病的前提。在临床上，FMD与其他水疱性疾病[例如猪水疱病(SVD)、水疱性疹(VES)和水疱性口炎(VS)等]不易区别，另外不同型的FMDV鉴定，对于制定FMD的有效防制措施甚是非常重要。因此，可疑的FMD病例必须进行认真的实验室诊断。近年来，随着生物技术的迅速发展和仪器设备的不断更新换代，FMD的检测技术也得到了空前的发展。已经建立了许多检测方法，主要有血清学诊断技术、生物学试验、分子生物学诊断技术等。
生物学试验包括动物试验、鸡胚接种和细胞培养。1951年Skinner用田间样品接种2一7日龄乳鼠分离增殖病毒成功。1955年Sellers培养初代猪肾细胞获得成功后，很快用于病毒分离增殖，与补体结合试验(CFT)结合用于FMD的诊断。随后培育成功的犊牛甲状腺初代细胞(CTY)、幼仓鼠肾细胞系(BHK21)细胞和猪肾细胞(1BRS2)都可用于诊断。病毒分离增殖和CFT在FMD诊断中沿用了近30年，尽管这种技术准确可靠，但不敏感，而且有些样品中存在抗补体活性，影响检测效果。
FMD的病原分离，通常应用试验动物(乳鼠、豚鼠、鸡胚)和组织培养细胞自患畜病料中分离病毒和进行毒型鉴定。一般采集新鲜未破溃的水疱皮或水疱褐瞥傻男?按实际情况适当增减)，每毫升含双抗1000单位。置4~C浸毒4～6h，离心取上清液接种试验动物或组织培养细胞。如果病料中含有FMDV，试验动物可出现典型的FMD症状。乳鼠经一次或数次传代接种后，其四肢麻痹，呼吸促迫，最后死亡。再接种豚鼠一般在接种后36—48h于接种部位形成FMD的特征性水疱，严重时起立困难。组织培养细胞分离病毒，常将悬液接种敏感细胞，如牛舌上皮、牛肾、猪肾、豚鼠肾、仓鼠肾和兔肾原代细胞或BHK—21、IBRS、PKj；等细胞系，观察细胞病变效应(CPE)，最敏感的细胞是犊牛甲状腺原代细胞。
![嗜中性粒细胞来袭时的微细胞之战[图]](/uploads/allimg/090616/02113V132-0_lit.jpg)
