根据病种不同，可采集脓液、创伤分泌物、穿刺液、血液、尿液、痰液、脑脊液、粪便。

    2．检验方法

(1)直接镜检  无菌取脓液、痰、渗出物及脑脊液(离心后取沉渣)涂片，经革兰染色后镜检，发现革兰阳性呈葡萄状排列的球菌，应及时向临床初步报告“查见革兰阳性葡萄状排列球菌，疑为葡萄球菌”，并进一步分离培养和证实。

    (2)分离培养  血标本(约5ml静脉血)注入50ral葡萄糖肉汤增菌培养基，迅速摇匀，以防凝固，37~C过夜，若均匀浑浊则转种血平板进一步鉴定，若无细菌生长，需连续观察7天，并以血平板确定有无细菌生长。

    脓液、尿道分泌物、脑脊液沉淀物可直接接种血平板，37~C过夜，可形成直径约2～3mm、产生不同色素的菌落。金黄色葡萄球菌在菌落周围有透明(口—)溶血环。

    尿标本，必要时作细菌菌落计数。

    粪便、呕吐物应接种高盐甘露醇平板，37~C过夜可形成淡黄色菌落。

    (3)鉴定试验

    ①血浆凝固酶试验。有玻片法和试管法，前者测结合型凝固酶，后者测游离型凝固酶，以EDTA抗凝兔血浆为最好。玻片法即刻血浆凝固为阳性；试管法以37~C水浴3—4h后凝固为阳性，24h不凝固为阴性。

    ②甘露醇发酵试验。金黄色葡萄球菌可发酵甘露醇。

    ③耐热核酸酶试验。用于检测金黄色葡萄球菌产生的耐热核酸酶。将被检菌的过夜培养肉汤沸水浴15min后滴加于甲苯胺蓝核酸琼脂上已打好的直径为2—5mm的孔内，置37℃孵育3l环绕孔周的蓝色琼脂变为粉红色为阳性，同时应设阴性、阳性对照。

    ④肠毒素测定。取食物中毒病人的呕吐物、粪便或剩余食物接种于高盐肉汤中，37℃ 24h培养后再分离纯菌种，培养48h，将肉汤煮沸30min，杀死细菌及其他毒素，经3000r／min离心1h后，取上清液2ml注人体重为500g左右幼猫腹腔，于4h内发生呕吐、腹泻、体温升高或死亡等现象者，提示有肠毒素存在的可能。

    ⑤SPA的检测。SPA能与兔抗羊红细胞血清中的IgG的FC段结合，使致敏羊红细胞发生凝集，A蛋白的存在是金黄色葡萄球菌的特征。

    根据上述的试验，如基本符合致病性葡萄球菌的鉴定依据，可报告：“有金黄色葡萄球菌生长”。

    近年来，凝固酶阴性葡萄球菌(coagulasemegativestaphylococci，CNS)成为医院感染的重要病原菌，是创伤、尿道、中枢神经系统感染和败血症的常见病原菌，而且耐药菌株比金黄色葡萄球菌更为多见，现已日益受到重视。

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