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分子生物学基因组DNA的提取方法

时间:2009-12-18 02:22|来源:实验室前沿会员投稿| 分享|点击:


1, 贴壁细胞用胰酶消化,离心收集。 内容来自实验室前沿网站

2, 细胞重悬于冰冷的PBS漂洗一次,离心收集。 实验室前沿,了解实验室动态

3, 重复2。 本文来自实验室前沿

4, 加入5ml DNA提取缓冲液,(10m mol/L Tris-cl, 0.1 mol/L EDTA, o.5% SDS),混匀。

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5, 加入25ul 蛋白酶K ,使终浓度达到100ug/ml, 混匀,50℃水浴3h,

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6, 用等体积的酚抽提一次,2500r/min 离心收集水相,

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用等体积的(酚,氯仿,异戊醇)混合物抽提一次,2500r/min 离心收集水相。

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用等体积的氯仿,异戊醇抽提一次。 内容来自实验室前沿网站

7, 加入等体积的5mol/L 的LiCL,混匀,冰浴,10min.

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8, 2500r/min,离心10min. 转上清与一离心管中。加入等体积的异丙醇。室温10分钟。 sysqy.com

9, 2500r/min,离心10min。弃上清。加入0.1倍 体积3mol/L 乙酸钠(PH5.2)与2倍体积-20℃预冷无水乙醇。-20℃ 20分钟。

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10, 12000r/min, 室温离心5分钟。弃上清。将DNA溶于适量TE中。本文来源实验室前沿Novermber1121的博客转载注明出处。

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Tags:方法,提取,离心,体积,加入,2500r/min,收集,一次
责任编辑:何辉

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