荧光抗体间接染色检测疟疾，疟疾(malaria)是疟原虫经按蚊叮咬传播的传染病，临床上以间歇性寒战、高热、大汗和脾大、贫血等为特征，恶性疟疾能引起凶险发作。常见检测方法为间接荧光抗体染色法检测疟原虫抗体。
内容来自实验室前沿网站
[检测方法]
[方法学原理] 抗原片上加患者血清，若血清中含有疟原虫抗体，即可与抗原结合成相应的抗原抗体复合物，此复合物再与荧光标记抗人IgG抗体结合，最后通过荧光显微镜观察荧光反应。
[试剂]
1．0．01mol／LpH7．6 PBS
2．荧光标记抗人IgG抗体
3．阴性对照、阳性对照血清
4．抗原片
[检测步骤]
1．用铅笔将抗原片(厚血膜)划成12个小格，放置蒸馏水中浸泡2～3min，以脱去血红蛋白，吹干。
2．用无水乙醇固定10min，吹干。
3．将被检血清用PBS从1：10开始作倍比稀释，将此稀释血清分别加在小格中，每格1小滴，同时设阳性对照和阴性对照。
4．将抗原片放湿盒中置37C环境中孵育30min，弃去残余血清，用PBS洗3次，每次3min，用蒸馏水漂洗一遍以脱盐，吹干。
5．将已稀释的荧光标记抗人IgG抗体加于各小格中心，每格1小滴，同上孵育，漂洗吹干，荧光显微镜检。
[结果判断] 阳性结果小格内有与原虫胞浆结构相似的明亮荧光；阴性结果原虫胞浆结构模糊无荧光。阴阳性对照结果无误，实验成立。
[正常参考值] 正常人抗体效价≤1：10，但疟疾流行区的正常人(成人)抗体效价稍高。
[注意事项]
1．具有较多裂殖体的血片，阳性检出率高，因为疟原虫的裂殖体的抗原性最强。
2．采用厚血膜做抗原片时，经溶血后疟原虫容易变形，故观察结果时要认真辨认(必要时可做瑞氏染色对照)以排除非特异性荧光。
3．加被检血清时，要防止互相串格。
[临床意义] 被检血清≥1：20阳性，表明疟原虫感染。流行区人们抗体阳性检出率较高。有学者报道患者抗体阳性率为55．1％，明显高于血膜染色检查法(阳性率28．1％)。间日疟患者经根治后荧光抗体的阳性率迅速下降。值得注意的是，已根治10余年的人群中尚有8％的人存在低滴度抗体水平。由此可见，本试验结果阳性的意义不在于诊断，而在于流行病学调查。
内容来自实验室前沿网站
