丽春红S适用于酸性水溶液，染色快但不持久，在后续处理中红色染料易被洗去。由于与蛋白质的结合是可逆性的，该染色法适合用于所有显示抗原的技术。因此，丽春红S可以常规用来验证转印以及定位分子量标记物或其他内参照。然而，该染色法不太灵敏，也很难以图像形式记录。若用钢笔或笔迹难擦掉的铅笔标明分子质量和泳道的位置可使染色更有效。
copyright sysqy.com
1．所需试剂
2％丽春红S(3—羟基—4—[2—磺基-4-硫代—苯偶氮基]-7-萘二磺酸)溶于30％三氯醋酸；30％磺基水杨酸；PBS。
2．操作步骤 copyright sysqy.com
(1)在染色之前，先配制丽春红S的浓储存液。即2％的丽春红S(3—羟基—4-磺基—4-硫代—苯偶氮基]—2，7—萘二磺酸)溶于30％三氯乙酸和30％磺基水杨酸中该液用水1：10稀释即成为应用液。
(2)用丽春红S应用液将硝酸纤维素膜洗1次。
(3)加入新鲜稀释的丽春红S应用液，并在室温下搅动5—10min。
(4)将硝酸纤维素膜放入PBS中漂洗数次，每次1～2rain，并更换PBS。
(5)根据需要将转印部位和分子量标准位置进行标记。
至此硝酸纤维素膜可用于封闭和加入抗体(见后)
储存液可在室温下稳定存放1年以上。如果使用PVDF膜(1mmobilon) 需将丽春红S应用液更换为1％醋酸。
3．常见问题
使用该法除了灵敏度较低外很少出现其他问题。若需要更强的对比或更高的灵敏度，可试用印度墨汁染色法。
