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补体C3测定(免疫比浊法)作业指导书

时间:2010-03-10 03:10|来源:实验室前沿| 分享|点击:


1. 原理

C3抗血清用缓冲液稀释后加到一份病人血清中,经过孵育后可以测定抗原抗体复合物产生的散射光,散射光结果和样品中的C3浓度成正比。
2. 标本采集:
2.1 标本采集前病人准备:受检者空腹
2.2 标本种类:血清或血浆
2.3  标本要求:取被检者静脉血2ml,室温放置不超过4小时,分离血清备用。
3.    标本储存:待测标本在2-8℃存放不超过24小时,-20℃不超过三个月,-70℃以下长期保存。避免反复冻融。
4. 标本运输:室温运输
5. 标本拒收标准:细菌污染、溶血、脂血不能作测定。
6. 试剂
6.1 试剂名称:补体C3检测试剂盒
6.2 试剂生产厂家:芬兰Orion诊断试剂公司
6.3 包装规格:60Test/kit
6.4 试剂盒组成:
缓冲液                    30ml              
空白缓冲液                30ml
抗血清试剂                0.5ml
定标液                    0.5ml
磁卡                      1
7. 仪器设备:
7.1 仪器名称:Orion TurboxR plus特定蛋白分析仪
7.2 仪器厂家:芬兰Orion集团公司
7.3 仪器型号:Turbox plus
8. 操作步骤:
8.1 试剂配制:
8.1.1 抗血清应用液准备:吸取500ul抗血清加到反应缓冲液中,轻轻混匀,应用液2-8可保存12个星期。
8.1.2 空白缓冲液:液体待用。
8.1.3 定标液:用0.9%NaCL进行1:51稀释。定标液根据IFCC提供的材料CRM470进行标定。
8.2 收集与处理样品:样品用0.9%Nacl进行1:51稀释。
8.3  为每一份样本测定准备一份样品空白,同样,为定标液另外准备一份定标液空白。
8.4  准备两份定标液测定(定标完成后,标准曲线数据存储在磁卡内。下次检测如使用同批试剂,可以不必做定标而直接使用磁卡上的定标信息)。
8.5 如下准备各比色管:

 
定标液
空白
定标液
测定
样品
空白
样品
测定
样品
定标液
空白缓冲液
抗血清应用液
25ul
500ul
25ul
500ul
25ul
500ul
25ul
500ul
sysqy.com

 
8.6 轻轻摇动混匀,室温18-25℃放置30±5分钟。
8.7 仪器测试步骤:参见TurboxR 特定蛋白分析仪作业指导书。
9. 结果计算:仪器直接计算并打印结果。
10. 临床意义:见《全国临床检验操作规程》第二版366-368页。C3既是参与古典途径又是参与路旁途径的补体蛋白,有炎症反应时,是一急性时相蛋白,其值会升高,低值见于肾小球性肾炎和免疫复合物疾病。
11. 参考范围:1.2-2.3g/L
12. 质量控制:建议使用厂家或临检中心提供的C3质控液和病人标本同时检测,结果必须在控制范围内。
13.操作性能:快速简便、灵敏度高、重复性好、特异性高。
14. 方法局限性:高脂血影响测定结果。
15. 超出范围结果处理:线性测定范围:0.3-3.7g/,如果结果超过3.7g/L,那么将样品用0.9%NaCl行1:2(1+1)稀释后再进行测定,结果乘以2。
16. 其它
16.1 试剂中含有0.1%的叠氮钠作为保护剂,叠氮钠易和铅铜急剧化合生成易爆炸的金属叠氮化合物,因此试剂一旦有溢出须用大量的水冲去。.
16.2 当要丢弃包括所有的实验材料和试剂时,须经121℃一个小时的高压灭菌。

16.3 定标液中的含有来源于人血清的材料,已经测定HCV、HBsAg和HIV抗体阴性,应仍然视为传染源。

本文来自实验室前沿

Tags:指导,作业,免疫,测定,试剂,标本,血清,样品,结果,空白,
责任编辑:何辉

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